1996年至2007年中科院生物化学与分子生物学历年考研真题
中科院1996生化与分子
一、是非题：10分。每题答对得1分，打错到扣半分，不答者倒扣。1、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。
2、与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。
3、维生素D和甲状腺激素的受体都在靶细胞核内。
4、凝胶过滤法可用于测定蛋白的分子量，分子量小的蛋白质先从柱上流出，分子量大的后流出。
5、两条单独肽链经链间二硫交联，组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白的两个亚基。
6、哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成ATP。
7、体细胞（双倍体）DNA含量约为生殖细胞DNA含量的两倍。
8、真核生物的基因不组成操纵子，不形成多顺子mRNA。
9、光合作用的总反应中，H2O中的氧参入到葡萄糖中去。
10、真核细胞和原核细胞核糖体中的RNA的数目和种类是相同的。
二、选择题：20分。答错不倒扣分。
1、从血红蛋白规水解得到的氨基酸的手性光学性质：
A．都是L型的； B。都是左旋的； C。并非都是L型的； D。有D型的也有L型的。
2、生物膜的厚度在
A．100nm左右 B．10nm左右 C．1nm左右
3、真核生物中经RNA聚合酶Ⅲ催化转录的产物是
A．mRNA B．hnRNA C．rRNA和5SRNA D．tRNA和5SRNA
4、消化系统的水解酶，大多是以非活性的酶原形式合成出来的，但也有例外，如
A．核糖核酸酶 B．羟肽酶 C．胃蛋白酶
5、在染色体中DNA的构型主要是
A．A型 B．B型 C．C型 D．Z型
6、超过滤于凝胶过滤
A．是两种性质不同，用处不同的蛋白质制备方法
B．是一种性质，但表现方法不同的蛋白质制备方法
C．是同一种方法的两种名词
7、研究蛋白质结构常用氧化法打开二硫键，所用的化学试剂是
A．亚硝酸 B．过氯酸 C．硫酸 D．过甲酸
8、雄激素对物质代谢最显著的一项重要作用是
A．促进肝脏糖原分解 B．增加脂肪贮存 C．加强蛋白质的同化作用 D。钾、钙、磷等物质的吸收
9、核苷酸从头合成中，嘧啶环的1位氮原子来自
A．天冬氨酸B．赖氨酸C．谷氨酰胺 D．甘氨酸
10、羧肽酶C专门水解C端倒数第二位是哪个氨基酸形成的肽链
A．精氨酸 B．赖氨酸 C．脯氨酸11、将RNA转移到硝基纤维素膜上的技术叫
A．Southern blotting B．Northern blotting C．Western blotting D．Eastern blotting
12、甘氨酸的解离常数分别为K1=2.34和K2=9.60，它的等电点（PI）是
A．7.26 B．5.97 C．7.14 D．10.77
13、对一个克隆的DNA片段做物理图谱分析，需要用
A．核酸外切酶 B．限制性内切酶 C．DNA连接酶 D．脱氧核糖核酸酶
14、原核生物基因上游的TATA盒一般处于什么区
A．-10 B．-35 C．-200 D．1K
15、通常使用什么测定多肽链的氨基末端
A．CNBr B．丹磺酰氯 C．6N HCl D．胰蛋白酶
16、蛋白质的变形伴随着结构上的变化是
A．肽键的断裂 B．丹基酸残基的化学修饰 C．一些侧链基团的暴露 D．二硫键的折开
17、生物膜主要成分是脂质蛋白质，其主要通过什么相连接
A．氢键 B．离子键 C．疏水作用 D．共价键
18、粗糙型内质网系的主要功能是
A．糖类的合成 B．脂类的合成 C．分泌性蛋白质的合成 D．必需氨基酸的合成
19、脂肪酸的合成中，每次肽链的延长都需要什么参加
A．乙酰辅酶A B．草酰乙酸 C．丙二酸单酰辅酶A D．甲硫氨酸
20、PPGPP在下列情况下被合成
A．细菌缺乏氮源时 B．细菌缺乏碳源时 C．细菌在环境温度太高时 D．细菌在环境温度太低时
三、填空题 （6题共40空格，共40分）
1、按劳取酬Michaelis公式，当V分别为0.9vmax和0.1Vmax时，它们相应的底物浓度的比值[S]0.9/[S]0.1应为 。
2、染色质中的DNA主要是以与 结合成复合体的形式存在，并形成串珠状的 结构。
3、一个有效的自杀性抑制必须具备：⑴ ⑵ ⑶ 。
4、核酸中的嘌呤环有四个氮原子，生物合成时分别来自 、 和 。
5、低密度脂蛋白的主要生理功能是 。
6、核苷三磷酸在代谢中起着重要的作用。 是能量和磷酸基团转移的重要物质， 参与单糖的转变和多糖的合成， 参与卵磷脂的合成， 供给肽链合成时所需要的能量。
7、镰刀性红细胞贫血症是一种先天遗传分子病，其病是由于正常血红蛋白分子中的一个 被 所置换。
8、糖原酵解过程中的第一个酶是 ；它有A和B两种形式，有活性的是 形式，A和B的差别在于A形式是 。
9、DNA B型右螺旋模型的螺距为 ，碱基转角为 ，碱基倾角为 。
10、磷脂的脂肪酰链长度愈 ，膜的流动性愈大。
11、核糖核苷二磷酸在和糖核苷酸还原酶作用下，生成脱氧核糖核苷二磷酸，需要 和 参与。
12、已知真核基因顺式作用元件有：启动子、 和 等。
13、作为信号跨膜传递的第二信使的物质有：cAMP、 、 和 等。
14、一些生长因子受体酶的活性，如表皮生长因子（EGF）受体有 活性，转化生长因子（TGF）受体有 活性。
15、用分光光度计测定蛋白质在280nm有吸收，主要是由于 和 残基侧链基团起作用。
16、维持蛋白质构想的次级键主要有 、 和 。
四、问答题（每题6分，共30分）
1、任举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺列
2、简述磷酸酯酶A2B、C和D的作用专一性与产物。
3、简述关于酶作用专一性的学说。
4、列出转录酶（Transcriptase）和逆转录酶（Reverse Transcriptase）的催化反应式。
5、DNA复制的准确性是通过怎样的机制实现的。
中科院1996年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》试题答案
一、是非题
减数分裂过程中DNA含量
细胞种类 性原细胞 初级性母细胞 次级性母细胞 性细胞
DNA含量 2a 4a 2a a
1、+；2、+ 肌红蛋白的氧结合曲线呈双曲线，而血红蛋白呈S形曲线。每个肌红蛋白分子仅有一个O2的结合位置。而血红蛋白分子是由四个亚基所组成，每一亚基均有一个O2的结合位置。肌红蛋白的功能是储备氧，只有当剧烈活动时血液输氧不足以补偿肌肉消耗而致局部氧分压很低的情况下，才放出氧来应急。血红蛋白的功能是运输氧，它既能在高氧分压条件下充分结合氧，又能在地氧分压条件下将大部分氧释放出来；3、+；4、- 凝胶过滤时，大分子因为不能进入分离介质内部而先被洗脱；5、- 亚基是专指具有四级结构的蛋白质中通过非共价键相互作用的蛋白质；6、- 一份子葡萄糖经无氧酵解可生成两分子ATP； 7、+（见下图）；8、+；9、- 在总反应中，掺入到葡萄糖中的氧来自CO2，不是H2O；10、- 完全不同，一般真核生物有四种RNA：28S，18S，5.8S，5S而原核生物有三种：23S，16S，5S。
二、选择题
1、A；2、B；3、D 真核生物RNA聚合酶Ⅲ的别名叫小分子RNA聚合酶，负责包括tRNA和5SrRNA在内的小分子RNA的合成；4、A 核糖核酸酶没有酶原形式，具有酶原形式的酶多数是蛋白酶，以免自溶；5、B；6、A 超滤指大分子不能通过滤膜，仅通过分子，而凝胶过滤时大分子不能进入分离介质，故先被洗脱；7、D；8、C 雄性激素对物质代谢最重要的作用就是促使蛋白质合成；9、A；10、C；11、B；12、B 甘氨酸的pI是其两个pK的平均值；13、B；14、A；15、B；16、C；17、C；18、C；19、C；20、A
三、填空题
1、81；2、组蛋白 核小体；3、无酶时不反应、被靶酶专一性的激活、与靶酶反应必须比解离更为迅速，即k1》kdis；4、甘氨酸 天冬氨酸 2个谷氨酰胺的酰胺氮；5、转运内源胆固醇脂；6、ATP UTP CTP GTP；7、谷氨酸 缬氨酸；8、糖原磷酸化酶 A 磷酸化；9、3.4 36 0；10、短；11、硫氧还蛋白硫氧还蛋白还原酶；12、增强子 沉默子 终止子；13、cGMP IP3 Ca2+ 硝氨醇 甘油二酯；14、蛋白酪氨酸激酶 蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶；15、酪氨酸 色氨酸；16、氢键 离子键 疏水作用
四、问答题
1、基本来说蛋白质的一级结构决定其高级结构，不过是有条件的。如同样一条肽链，在存在变性剂的条件下是松散的。这里所说的蛋白质三级结构取决于它的氨基酸序列，只在生理条件下蛋白质的一级结构和其三级结构之间的特定对应关系。典型的例子是牛胰核糖核苷酶的二硫键被还原，肽链松散后，经适当的条件，致使肽链的二硫键正确配对，此时肽链仍能呈现具有生物活性的天然构象。当前有相当多的蛋白质工程的例子可以说明，肽链中某些残基的突变可以引起突变蛋白质的构象改变。
2、磷脂酶A2专一水解磷酯C2位脂肪酸，产物为溶血磷脂脂肪酸；磷脂酶B可分别水解磷脂C1和C2位上两个脂肪酸，产物为溶血磷脂、脂肪酸、甘油磷脂含胆碱；磷脂酶C作用于磷脂C3的磷脂酰键，产物为甘油二酯和磷酸含氮碱；磷脂酶D作用于磷酸与含氮碱之间的酯键，产物是磷脂酸和含氮碱。
3、酶作用的专一性学说的基本要点是，酶分子中存在有一个识别底物的结合位点，同时酶分子还存在着一个可以诱导底物结构发生变化的反映变化的催化位点。包括没作用的专一性学说在内的机体重的任何一种分子键的相互作用都是生物界和生物分子长期进化的结果。主要有：①锁钥学说②诱导契合学会说—酶受底物诱导而变形③张力学说—底物变性以时应酶
4、⑴转录酶，即DNA指导下的RNA合成酶，催化的反映 mATP+nGTP+pCTP+qUTP=RNA+(m+n+p+q)Ppi
⑵逆转录酶即RNA指导下的DNA合成酶，此酶有三种活性，主要催化
mdATP+ndGTP+pdCTP+qdUTP=DNA+(m+n+p+q)Ppi
逆转录酶的另外两个活性是水解和新合成DNA杂交中作为逆转录模板的RNA，以及指导有新合成的DNA复制DNA。
5、DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出错，用RNA引用即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性；DNA聚合酶本身具有校对作用，可以将不正确插入的核苷酸切除掉，重新加上正确的核苷酸。这样对每个核苷酸的掺入就有两次机会。首先按碱基配对原则，错误核苷酸插入的几率为10-4—10-5，然后DNA聚合酶本身的校对作用又可以是错误核苷酸掺入的几率为10-8—10-10。另外，DNA合成起始时，冈崎片段合成开始时都有RNA。由于RNA最终也要被切除掉，这样就提高了DNA复制的准确性。
中科院1997生化与分子
一、是非题。12分。每题答对得1分，打错到扣半分，不答者倒扣。答“是”写“+”，答“非”写“-”。
1、因为丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸都是蛋白质磷酸化的位点，因此所有蛋白质激酶均能使蛋白质中这三种氨基酸残基磷酸化。
2、蛋白质的变形作用的实质就是蛋白质分子中所有的键均被破环引起天然构象的解体。
3、蛋白质分子中的结构域（domain）、亚基（subunit）、纹基（motif）都是相同的概念。
4、水是不能通透纸双层膜的。
5、蛋白激酶属于磷酸转移酶类，催化磷酸根共价转移到蛋白质分子上的反应。
6、具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1的。
7、mRNA的编码区不含有修饰核苷酸。
8、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示为Cm。
9、携带同一种氨基酸的不同tRNA称为tRNA的等受体，它们之间的差异在于反密码。
10、植物能利用氨或硝铵为氮源合成氨基酸，但不能利用空气中的氮。
11、逆转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活性。
12、氨基酸的碳骨架进行氧化分解时，先要形成能够进入三羧酸循环的化合物。
二、选择题：20分。答错不倒扣分。
1、在凝血过程中发挥作用的许多凝血因子的生物合成依赖于下述哪一种维生素
A．维生素K B．维生素E C．维生素C D．维生素A
2、目前已经知道某种金属离子在细胞信号传导使细胞供能时起十分重要作用，它是
A．Na+ B．K+ C．Ca2+ D．Mg2+
3、镰刀状细胞血病是最早被认识的一种分子病，它是由于血红蛋白的两条B链中的两个谷氨酸分别为下属的氨基酸所代替
A．丙氨酸 B．缬氨酸 C．丝氨酸 D．苏氨酸
4、1996年P。C。Doherty和R。M。Zinkernagel因为下列哪一领域研究的重要贡献而获诺贝尔医学和生理学费
A．发育生物学 B．免疫学 C．分子病毒学 D．结构生活生物学
5、形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和相邻的两个碳原子处于
A．不断扰动状态 B．可以相对自由旋转 C．同一平面 D．虽不同外界环境而变化的状态
6、三羧酸循环中，下列哪一个酶不是调控酶
A．柠檬酸合成酶 B．异柠檬酸脱氢酶 C．苹果酸脱氢酶 D．酮戊二酸脱氢酶
7、以下酶中哪一个是属于黄素核苷酸与酶蛋白以共价键相连的
A．NADH脱氢酶 B．甘油磷酸脱氢酶 C．胆碱脱氢酶 D．琥珀酸脱氢酶
8、在酶的双倒数作图中，只改变斜率不改变横轴截矩的抑制剂属于
A．非竞争性抑制剂 B．竞争性抑制剂 C．反竞争性抑制剂
9、A．提高反应的活化能B．降低反应的活化能C．促使正向反应速度提高
10、端粒酶（tolermerase）是属于
A．限制性内切酶 B．DNA聚合酶 C．RNA聚合酶 D．肽酰转移酶
11、用寡聚脱氧核苷胸苷（Oligo dT）纤维素柱层析分离mRNA是属于
A．分配层析 B．交换层析 C．亲和层析 D．薄版层析
12、下列RNA中含修饰核苷酸最多的是
A．mRNA B．rRNA C．tRNA D．病毒RNA
13、转录真核rRNA的酶是
A．RNA聚合酶Ⅰ B．RNA聚合酶Ⅱ C．RNA聚合酶Ⅲ
14、一个RNA片段AGGGCUGA，T1酶全酶切后HPLC分析可获得的峰的数量为
A．2 B．3 C．4 D．5
15、氨酰tRNA合成酶的底物数为
A．1 B．2 C．3 D．4
16、雌二醇生物合成的直接前体是
A．雌酮 B．孕酮 C．睾酮 D．雌三醇
17、真核生物有DNA聚合酶α、β、γ、δ，其中δ主要负责
A．DNA的复制 B．切除引物 C．参与修复 D．解开双螺旋
18、长链脂肪酰CoA经氧化作用，生成乙酰CoA是在什么细胞器上进行的
A．微粒体 B．内质网 C．线粒体 D．细胞膜
19、DNA分子上能被依赖DNA的RNA聚合酶特意识别的部位是
A．衰减子 B．操纵子 C．启动子 D．终止子
20、哺乳动物在正常生理条件下，一般氨基酸的氨基被脱去，主要通过
A．氨基酸氧化酶的作用 B．转录酶的作用C．转氨酶和谷氨酸脱酶的联合作用 D．谷氨酸脱氢酶的作用
三、填空题 （20题共44空格，共44分）
1、免疫球蛋白（IgG）含有两条高分子量的 和两条低分子量的 ，这些链通过 连接成Y字形结构，每个免疫球蛋白分子含有 抗原结构部位。
2、真核细胞多肽全成的起始氨基酸均为 ，而原核细胞的起始氨基酸为 。
3、蛋白质分子的二级结构和三级结构之间还经常存在两种结构组合体称谓 和 ，它们都可以充当三级结构的组合配件。
4、糖肽连接键的类型有 ， 。
5、G蛋白具有 酶的活性。
6、1926年Sumner从刀豆中到了 酶结晶，从而第一次证明了酶的蛋白质本质。
7、糖酵解的关键调控酶是 。果糖-2，6-二磷酸的作用是 糖酵解。
8、判断一个酶的纯化步骤优劣的一般依据 的提高倍数和 的回收率。
9、到目前为止发现的G蛋白偶联受体中大多数都是 结构。
10、磷脂被磷脂酶C水解生成 和 。
11、生物膜的主要组分是 和 。
12、DNA空间结构模型中，双螺旋的直径为 ，碱基堆积距离为 ，两核苷酸之间的夹角为36°，每对螺旋由10对碱基组成。
13、一tRNA的反密码子为GGC，它可识别的密码子为 、 。
14、多核苷酸磷酸激酶（PNKase）可以将32P-ATP的磷酸基转移到核酸链的 端，而标记RNA的3’端常用 酸和5’-32P标记的 。
15、核酸的增色作用是由两条链间的 和同一条链 产生。
16、mRNA上突变常可造成致死作用，但生物体可通过tRNA反密码子的突变而存活这种tRNA的突变又称 ，而这种tRNA称谓 tRNA。
17、组氨酸的生物合成需要 以及 的N-C基团，因此组氨酸合成也可认为是嘌呤核苷酸代谢的一个分支。
18、维生素B6有 、 、 。
19、真核细胞染色质中的DNA主要是与 结合复合体，并形成半珠状 结构。
20、核糖核苷二磷酸在和糖核苷酸还原酶作用下，生成脱氧核糖核苷二磷酸，这一过程还需要 和 参与。
四、问答题。4题，共24分。
K2
K1
E+S ES E+P
1、用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还需要加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？要测定蛋白质的二硫键位置，需用什么方法？请简述之。
2、对于下列酶促反应，请用稳态方法推出米氏方程（写明推到过程）
K3
3、简述真核生物RNA的种类及其主要功能。
4、简述乳糖操纵子的调控机制。
中科院1997年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》卷答案
一、是非题
1、+ 2、- 3、- 亚基与结构域有一定相似之处，但是结构域是一条肽链中的一个部分，通过共价键与其他部分连接，而亚基一定是通过非共价键与其它亚基相互作用。而模体则是在不同蛋白质中存在的一些序列或立体结构中类似的部分。4、+ 水是不能自由通过脂双层膜的，但是膜上具有特异的水通道。5、- 激酶催化的磷酸转移反应的磷酸基团不是游离的磷酸，而是来自ATP或GTP。6、+ 7、+ 8、+ 9、-tRNA等受体的结构差异大多数不反映在反密码子上，而在其他部分 10、+ 11、- 还具有DNA指导的DNA聚合酶和RnaseH等活性 12、+
二、选择题
1、A；2、C 钙调蛋白的发现，使得钙离子被确认为是一种细胞信号传导的载体，又被称为细胞信号载体；3、B；4、B；5、C；6、C；7、D；8、A；9、B；10、B；11、C；12、C；13、A；14、C；15、C 分别是氨基酸、ATP、tRNA；16、C；17、A DNA聚合酶δ具有细胞核合成DNA链的能力，但必须在由DNA聚合酶α形成引物后形成；18、C；19、C；20、A
三、填空题
1、重链，轻链，二硫键，2；2、甲硫氨酸，N-甲酰甲硫氨酸；3、超二级结构，结构域；4、O-糖苷键，N-糖苷键；5、GTP水解酶；6、脲；7、6-磷酸果糖-1-激酶，增加；8、比活提高的倍数，活性回收率的高低；9、7次跨膜结构；10、二酰基甘油，磷酸碱基；11、磷脂，蛋白质；12、2nm，0.34nm；13、GCC，GCU；14、5’，T4RNA连接酶，pCp/胞苷3’，5’-二磷酸；15、解链，断链；16、校正，校正；17、磷酸核糖焦磷酸/PRPP；18、吡哆醇，吡哆醛，吡哆胺；19、组蛋白，核小体；20、硫氧还蛋白，硫氧还蛋白还原酶
四、问答题
1、打开二硫键最正常用的方法是使用巯基试剂。如巯基乙醇，可是参与二硫键的2个半胱氨酸还原酶带有游离巯基的半胱氨酸。为了使还原反应顺利进行，通常加入高浓度的尿素等变性剂。加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化，而是进一步进行化学结构的研究，可以将巯基转化为其他的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应，另外还有甲酸氧化法和亚硫酸还原法等。
2、ES复合物的形成速度为：d[ES] /dt=K1（[E]－[ES]）×[S]
ES复合物的分解速度为：-d[ES] /dt=K2[E]+K-1[ES]
在稳态条件下，ES复合物的形成速度等于分解速度：K1（[E]－[ES]）×[S]=K2[E]+K-1[ES]
即（[E]－[ES]）×[S]/ [ES] =（K2+K-1）/K1
若（K2+K-1）/K1=Km 即[ES] =[E] [S]/（Km+[S]）①
酶反应速度 v=K2[ES] 酶被底物饱和时[E]=[ES] 酶反应速度Vmax=K2[ES]=K2[E]②
由①②可得 v/Vmax=[S]/(Km+[S])
3、RNA主要包括r RNA ：作为装配者并具有催化作用；t RNA ：作为转换器，携带氨基酸并具有解译作用；m RNA ：作为信使，携带DNA的遗传信息并在蛋白质合成中作为模板。此外还包括反义RNA 。核酶等。总结可知RNA 有五大类功能：①控制蛋白质的合成②作用于RNA转录后加工修饰③基因表达与细胞功能的调节④生物催化与其他细胞持家功能⑤遗传信息的加工与进化。
4、乳糖操纵子由调节基因（R）、启动子（P）、操纵基因（O）和三个代谢乳糖的酶的结构基因：lacZ、lacY、lacA组成。lacZ编码β-半乳糖苷酶，lacY编码β-半乳糖苷通透酶，lacA编码β-半乳糖苷转乙酰酶。在有葡萄糖的情况下，细菌不利用乳糖，此时，调节基因（R）表达的阻遏蛋白能与操纵基因（O）结合，阻断识别启动子（P）的RNA聚合酶通过操纵基因（O）而转录结构基因；葡萄糖耗尽时，乳糖被利用，此时乳糖可与阻遏蛋白形成复合物，RNA聚合酶于是能通过操纵基因（O）转录得到三个酶，其中，乳糖是诱导物，产物叫诱导酶。
中科院1998生化与分子
一、是非题：12题，共12分。
1、糖蛋白中的糖肽连接键，是一种共价键，简称为糖肽键。 （ ）
2、电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。（ ）
3、激素按其化学本质来说是有特定生理功能的多肽或蛋白质（ ）
4、激素是通过膜受体引发生物效应的。（ ）
5、真核细胞所有的细胞色素氧化酶都位于线粒体内膜上。（ ）
6、蛋白质生物合成之后的共价修饰，都属于不可逆的化学修饰。（ ）
7、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示为Cm。（ ）
8、DNA固相机器合成时用的活化单体是dNTP。（）
9、tRNA只在蛋白质生物合成中起作用。（ ）
10、起转录调控作用的DNA元件都能结合蛋白质因子。（ ）
11、完成了水稻基因组物理图谱就可以宣布水稻遗传信息之谜破译了。（ ）
12、人休需要的烟酰胺可以由色氨酸来合成，因此在营养上色氨酸可以替代烟酰胺。（ ）
二、选择题：20题，每题1分，共20分。选择答案的号码必须填入（ ）中，答错不倒扣。
1、蛋白质在下列哪一种水解过程中，由于多数氨基酸被遭到不同程度的破坏，产生消旋现象。（）
①酸水解； ②酶水解； ③碱水解；
2、胰岛素和表皮生长因子的受体实际上是一种酶，它们是：（ ）
①磷酸化酶； ②蛋白水解酶； ③酪氨酸激酶
3、要断裂由甲硫氨酸残基的羧基参加形成的肽键，可用：（ ）
①胰蛋白酶； ②尿素； ③溴化氢；
4、在测定蛋白质一级结构时，为了对二硫键进行定位，需将含二硫键的肽段分离，此时可用下列哪种方法。
①过甲酸氧化； ②对角线电泳； ③硫基化合物还原。
5、下列哪一种是目前研究蛋白质分子空间结构最常用的方法
①X光衍射法；②圆二色性；③荧光光谱
6、如果某个单底物酶促反应是二级反应， E+S Kcat ES→P
那么决定其催化反应速度的常数是：（）
①Km; ②Ks; ③Kcat; ④Kcat/Km。
7、酶促反应降低反应活化能的能量来源于：（ ）
①底物化学链的断裂可释放的化学能； ②酶与底物结合能；③底物形变能；④酶构象变化所释放的能量。
8、某个非底物抑制的酶，在实验上除无法测定初速度以外，造成Michacl- Menten方程失效原因是：（）
①别构酶； ②底物对酸激活作用；③一定浓度范围内产物抑制作用。
9、以NADP+作为氢受体形成NADPH的代谢途径是：（）
①糖酵解； ②三羧酸循环；③ 磷酸戊糖途径； ④糖元异生
10、氧化磷酸化作用（oxidative phosphorylation）是指将生物氧化过程释计的自由能转移并生成：（）
①NADPH; ②NADH; ③ATP; ④FADH。
11、转录真核生物t RNA的酶是：（）
①RNA聚合酶I；②RNA聚合酶II；③RNA聚合酶III；④反转录酶。
12、嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成是由于它是：（ ）
①核糖体失活蛋白；②核糖核酸酶；③氨酰tRNA的类似物；④RNA聚合酶的抑制剂。
13、为核糖体上的蛋白质生物合成提供能量的分子是：
①ATP； ②GTP； ③UTP； ④CTP。
14、真核生物5S RNA 基因的启动子在转录区结构基因的：
①上游； ②内部； ③下游。
15、大肠杆菌中主要行使复制功能的酶是：
①DNA聚合酶I②DNA聚合酶II③DNA聚合酶III④Klenow酶
16、尿素合成的中间物氨基甲酰磷酸是在什么中合成的：
①胞液；②内质网；③线粒体；④细胞核。
17、逆转录酶具有结合什么的活性，并以它为引物合成DNA链。
①MRNA; ②TRNA; ③核内小分子RNA； ④tRNA.
18、RNaseH能特异的切割为：
① 双链DNA；②双链RNA；③RNA-DNA杂合分子中的DNA；④RNA-DNA杂合分子中的RNA。
19、酵解的速度决定于：
①磷酸葡萄糖变位酶；②磷酸果糖激酶；③醛缩酶；④磷酸甘油激酶。
20、测定蛋白质在DNA上的结合部位常用什么方法：
①Western blotting; ②PCR; ③限制性图谱分析； ④DNase I保护足印分析。
三、填空题：17题共40空格，第空格答对给1分，共40分。
1、已知蛋白质存在的超二级结构有三种基本组合形式_________、______、_________。
2、免疫球蛋白G在用___处理时可产生Fab片段，而用___处理时，可产生（Gab’）2片段。
3、因为_________、_________和_________等三种氨基酸残基的侧链基团在紫外区具有光吸收能力，所以在_______________nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质。
4、当蛋白质和配基结合后，改变了该蛋白质的构象，从而改变该蛋白质的生物活性的现象称为_____。
5、一氧化氮（NO）是最上的信使分子之一，它主要功能是____________________。
6、膜蛋白跨膜部份的结构（构象）大多数是________________________。
7、除了膜脂肪酰链的长度以外，影响膜流动性的主要因素是_________________。
8、同一种神经介质作用于不同靶细胞引起截然相反的作用，是因为靶细胞上________不同。
9、内质网(endoplasmicreticulum)有Ca2+的储存器，_________作为信使分子可以促成Ca2+的释放。
10、现已发现上百种基因调节蛋白（gene regulatory Proteins），但它们识别双螺旋DNA特顺序的结构基元（structural motifs）仅发现有限几种，请写出_________、______、______________和___ 。
11、真核生物t RNA的加工，成熟过程包括：__________，______，_______、___________和____ 。
12、sn RNA主要参于__________的加工成熟，sn RNA主要参于______________的加工成熟。
13、核糖体失活蛋白有两类，它们分别具有位点专一性的____________和____________活性。
14、现在普遍认为核糖体上存在_____________个tRNA结合位点。
15、与正确和有效翻译作用相关的m RNA结构元件有___________、________和__________。
16、在糖异生作用中由丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸，第一步反应生成草酰乙酸是_______酶催化的，同时要消耗_____；第二步反应是_______酶催化的，同时消耗___________。
17、含有腺苷酸的辅酶有______________、_______________和______________等多种。
四、问答题：4题，每题7分，共28分。
1、简述1997年获诺贝尔医学及生理学奖的美国科学家S. Prusiner的主要贡献。
2、真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是？
3、一DNA模板的初始转录物经T1酶完全水解得两组分。一组分经RnaseA完全作用得过且过pppUp、Up、ApGp。另一组分经RnaseA完全作用得Cp和ApU。同样模板分别经含-32p-GTP（A）和-32p-GTP（B）的NTP转录，并分别经修饰酶修饰后，经Rnase T2酶解，转录物A得I32P，转录物B得m1I32P的放射性产物，请说出：（1）该DNA模板的序列和RNA转录物的序物；（2）该片段经修饰后的修饰核苷酸数量，修饰核苷种类及位置；（3）推测的过程。
4、简述乙酰辅酶A在碳化合物代谢中的作用。
中科院1998年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、+；2、+；3、- 除了肽类激素外，还有固醇类激素；4、+；5、+；6、- 磷酸化、ADP核糖基化和细胞质内的单个O-GlcNAc 修饰均是可逆的；7、+；8、- 有机合成用不是dNTP，而是活化dNMP DNA酶促合成的原材料是dNTP；9、-；10、+；11、-；12、+
二、选择题
1、C；2、C；3、C；4、B；5、A；6、D；7、B；8、B；9、C；10、C；11、C 真核生物RNA聚合酶Ⅲ又叫小分子RNA聚合酶，负责包括tRNA和5SrRNA在内的小分子RNA的合成；12、C；13、B 蛋白质起始物生成除需要GTP提供能量外，还需要Mg2+、NH4+及三个起始因子（IF1、IF2、IF3）在起始tRNA中。14、C；15、C；16、C；17、B；18、D；19、B；20、D
三、填空题
1、αα，βαβ，βββ；2、木瓜蛋白酶，胃蛋白酶，（Fab）2；3、酪氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，280；4、别构效应；5、①抑制血小板凝集②改变cGMP水平，参与神经递质信号转导③激活DNA修复酶④高浓度时促进前列腺素的合成⑤引起细胞衰老和死亡；6、α螺旋结构；7、脂肪酸链的不饱和度；8、受体；9、三磷酸肌醇/IP3；10、锌指，亮氨酸拉链，α-螺旋-转角-α-螺旋；11、锌指，修饰，剪切，添加CCA尾，编辑；12、mRNA，rRNA；13、磷酸二酯酶，N-糖苷酶；14、3；15、核糖体结合位点，起始密码子，终止密码子；16、丙酮羧化，ATP，磷酸烯醇丙酮酸羧化，GTP；17、烟酰胺核苷酸，黄素腺嘌呤二核苷酸，辅酶A
四、问答题
1、Prusiner的主要贡献是研究疯牛病的过程，发现了某些蛋白质的立体结构可受到一些非核酸因素的影响而发生改变。同时这些立体结构的改变进一步引起其它相同蛋白质立体结构的改变，整个过程犹如病原体的“感染”。立体结构改变的蛋白质可以导致不容型的聚集物的形成，最终发生病变。有这些结果产生了两个方面概念的改变，一是某些疾病的感染可以不需要核酸，二是相同一级结构的蛋白质可以呈现不同的立体结构，即蛋白质的高级结构除了一级结构外，还受其他因素的影响。
2、真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。
RNA聚合酶Ⅰ存在与核仁中，其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。
RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。
RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。
相关内容：原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。
3、（1）根据以下原理：①初始转录物的5’端为三磷酸基（ppp-），3’端为核苷；②RNase T1的专一性是切割RNA鸟苷3’磷酸酯键（-Cp↓）；③RNase A的专一性是切割RNA嘧啶核苷3’磷酸酯键（-Cp↓+ -Up↓），故起始转录物是pppUpUpApGpCpApU
（2）根据毗邻分析原理：a-32p-NTP中的a-32p可掺入到该核苷5’邻位核苷的3’位。因此，转录时加入a-32p-GTP，产物经修饰后用RNase T2酶解得到I32p，表明是序列中的A32-pG→I32pG;同样转录时加入a-32p-UTP，产物经修饰后RNase T2酶解得到m1I32p，表明是序列中的A32pU→m1I32pU，所以初始转录物经修饰得到的序列是：pppUpUpIpGpCpm1I32pU。（3）略。
4、乙酰辅酶A是活化了的乙酸基团（CH3CO-=乙酰基）与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是硫酯。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后产生的丙酮酸氧化脱羧的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸。循环也叫柠檬酸循环。乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，丙酮酸氧化脱羧，脂酸的beta-氧化的产物。同时，它是脂酸合成、胆固醇合成、酮体生成的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环，即通过三羧酸循环将糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢彼此沟通，有机联系在一起。
中科院1999生化与分子
一、是非题：20题，共20分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”，写在题后的（ ）中。
1、单克隆和多克隆抗体的差别在于制备方式的不同。
2、气体分子，如NO，是可以作为信号分子在生物体内行使功能的。
3、二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。
4、所有信号肽的位置均在新生肽的N端。
5、对于可逆性抑制剂的抑制作用，抑制50%时的抑制剂浓度等于其抑制解离常数Ki。
6、在酶的催化反应中，HIS残基的咪唑基既可以起碱催化作用，也可以起酸催化作用。
7、蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser、Thr、和Tyr外，还有His、Cys、Asp等。
8、维生素B1的化学名称为硫胺素，它的磷酸酯为脱羧辅酶。
9、线粒体内膜与外膜的结构完全不同，它们是完全分开互不接触的两种膜。
10、细胞色素氧化酶与细胞色素b-c1复合物的三维空间结构已得到阐明。
11、氧化磷酸化也是可逆的。
12、嗜盐菌视紫红蛋白与视网膜视紫红蛋白不同，前者经光照后导致跨膜质子梯度，后者经光照后导致跨膜钠离子流动。
13、端粒酶（telomerase）是一种反转录酶。
14、转录不需要引物，而反转录必须有引物。
15、DNA复制时，前导链合成方向是5’→3’，后随链则是3’→5’生成。
16、人基因组的碱基对数目为2.9×109，是自然界最大的。
17、细胞器DNA的复制并不限于S期，可在细胞周期的各期中进行。
18、基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。
19、真核生物细胞核内不均一RNA(hnRNA)分子量虽然不均一，但其半衰期长，比胞质成熟mRNA更为稳定。
20、DNA复制是在起始阶段进行控制的，一旦复制开始，它即进行下去，直到整个复制子完成复制。
二、选择题：25题，每题一分，共25分。
1、生长调节素（omtomedin）是
A．胰岛素 B．生长激素 C．胰岛素样生长激素Ⅰ和Ⅱ D．表皮生长因子
2、生物体内氨的转运主要通过
A．尿素循环 B．谷氨酰胺 C．尿酸
3、识别信号肽的是一种信号识别颗粒，它是
A．糖蛋白 B．信号肽 C．脂蛋白 D．核蛋白
4、微管蛋白的异二聚体上的结合位点是
A．GTP B．ATP C．cAMP D．ADP
5、基因剔除（knock out）的方法主要是用来阐述
A．基因的结构 B．基因的调控 C．基因的表达 D．基因的功能
6、胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是
A．His，Arg，Glu B．Ser，Lys，Asp C．Ser，His，Asp D．Ser，Arg，Glu
7、MWC模型和KNF模型的一个区别是
A．MWC模型可以解释正协同性，而KNF模型不能
B．MWC模型可以解释负协同性，而KNF模型不能
C．MWC模型不能解释正协同性，而KNF模型能
D．MWC模型不能解释负协同性，而KNF能
8、琥珀酸脱氢酶所需要的辅酶（基）是
A．CoA B．FAD C．NAD+ D．NADP+
9、对于一个遵守米氏方程的酶，当活性达到最大反应速度的99%时，底物浓度是其Km值的倍数为
A．10 B．100 C．90 D．99
10、一个酶有多种底物，判断其底物专一性强弱应依据参数
A．Kcat B．Km C．Kcat/Km
11、NO的生成主要来自
A．组氨酸 B．赖氨酸 C．精氨酸 D．谷氨酸胺
12、哺乳动物细胞质膜的标志酶是
A．钠钾ATP酶 B．细胞色素氧化酶 C．H+-ATP D．谷氨酸胺
13、辅酶Q是一种化合物，它含
A．硫胺素 B．异咯嗪结构 C．异戊二烯单位的醌类 D．铁、硫
14、典型哺乳动物细胞内外的Na+，K+离子浓度
A．细胞内Na+，K+均比细胞外高 B．细胞内Na+，K+均比细胞外低
C．细胞内K+比细胞外高，Na+比细胞外低 D．细胞内Na+比细胞外高，K+比细胞外低
15、当线粒体呼吸处于状态4时，内膜两侧的pH差可以达到
A．0.1PH单位 B．1PH单位 C．1.5PH单位 D．>2PH单位
16、端粒酶（telomerase）是一种蛋白质-RNA复合物，其中RNA起
A．催化作用 B．延伸作用 C．引物作用 D．模板左右
17、新生多肽链的信号肽与下列哪种物质识别，从而引导肽链进入内质网
A．核糖体 B．核糖体亚基 C．信号肽酶 D．信号肽识别颗粒（SRP）
18、真核生物mRNA帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，其方式是
A．2’-5’ B．3’-5’ C．3’-3’ D．5’-5’
19、与核酸中嘌呤环和嘧啶环上的原子来源都有关的氨基酸是
A．丙氨酸 B．天冬氨酸 C．亮氨酸 D．甲硫氨酸
20、大肠杆菌mRNA上起始密码子上有的SD序列可与某种RNA的3’端配对，然后启动多肽链生成，这种RNA是
A．tRNA B．SnRNA C．16srRNA D．23srRNA
21、染色质DNA的碱基可被甲基化，DNA甲基化的作用是
A．关闭某些基因 B．活化某些基因
C．可关闭某些基因，同时可以活化另一些基因 D．与基因表达的调节无关
22、遍在蛋白（ubiquitin）广泛分布于各类细胞，它与蛋白质结合后，造成
A．蛋白质更加稳定 B．蛋白质有效转运 C．蛋白质迅速降解 D．蛋白质固定在细胞膜上
23、DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的
A．嘧啶二聚体 B．嘌呤二聚体 C．嘧啶-嘌呤二聚体
24、λ噬菌体侵入寄主细胞后，决定它进入裂解循环的基因产物是
A．N B．Q C．Cro D．CI
25、环状的线粒体DNA进行复制的方法采用
A．多起点双向 B．滚环 C．D-环 D．单起点双向
三、填空题；12题，共25分，一空一分。
1、糖蛋白中糖苷链主要有两类，即_______和_______。
2、氨基酸氨基中的一个H原子可以被烃基取代，称为烃基化反应，反应生成_______或简称_______，此反应可被用来鉴定多肽或蛋白质的_______末端氨基酸。
3、酶与配基结合实验的Scatchard作图表现为一种罩形曲线，表明酶与配基结合具有_______。
4、TPCK是通过对_______残基的烷化而专一的对_______酶进行亲和标记。
5、维生素D原和胆固醇的化学结构中都具有_______的结构。
6、磷酸化酶激酶是一种依赖_______的蛋白激酶。
7、线粒体氧化磷酸化呼吸控制的定量表达是_______。
8、与G蛋白偶联的质膜受体均有_______的结构。
9、线粒体内膜胞浆侧的膜电位比基质侧_______。
10、在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA可是别的密码子有_______、_______、_______。
11、参与DNA损伤切除修复的酶主要有_______、_______、_______、_______。
12、转录调控因子的结合DNA功能域的结构有锌指，_______、_______、_______等。
四、问答题：5题，共30分。
1、一个蛋白质的氨基酸序列显示，其内部不同序列位置存在两个甲硫氨酸残基，试问：
⑴用什么试剂，可把此蛋白质裂解成片段？
⑵如果裂解的片段分子量均在10000以上，且差距较大，可用何种方法分离？
⑶用什么简单方法，可以测定这些片断的分子量？
⑷如何证明它们都是从一个蛋白质分子裂解下来的片段？
⑸如何证明它们在该蛋白质内的排列次序？
2、简述PH对酶反应的影响及其原因。
3、试述物质跨膜的被动运送，促使扩散和主动运送的基本特点。
4、举出两种蛋白质序列与其基因序列存在的不对应关系及其可能原因。
5、用生物技术能实现从鸡蛋中分离人的γ干扰素么？为什么？
中科院1999年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、判断题
1、- 制备方式不同，其根本的区别是反应性质不同。考察点：单克隆抗体的概念。2、+ 考察点：信号及信号转导。相关内容：信号转导的分类。3、- 考察点：蛋白质的结构层次。相关内容：结构域，单体蛋白（有几个独立的肽段以S—S连接的小分子蛋白）。4、- 考察点：信号肽学说，相关内容：蛋白质修饰及转运。5、- 考察点：可逆抑制（竞争性抑制、非竞争性抑制）。相关内容：抑制反应的米氏方程、特点。6、+ 考察点：酶催化的高效性。教材内容：His残基的咪唑基，其解离常数为6，在中性条件下一般以酸性形式存在，另一半以碱性形式存在。即咪唑基即可作为质子供体，又可作为质子受体在催化中发挥作用。因此咪唑基是一个最有效最活泼的一个催化功能基团；相关内容：酶催化的特点。7、+ 考察点：磷酸化的部位。要有-OH基团。相关内容：磷酸化的概念。8、+ 考察点：维生素B1。教材内容：维生素B1，又称为硫胺素，广泛分布在植物中，特别是种子外皮和胚芽与ATP作用转变为焦磷酸硫胺素（TPP），是催化丙酮酸和α-酮戊二酸脱羧的辅酶。相关内容：维生素B1的结构。9、- 考察点：线粒体的膜结构。教材内容：细胞色素氧化酶与细胞色素的作用、结构。10、- 考察点：生物化学研究进展。相关内容：细胞色素氧化酶与细胞色素的作用、结构。11、- 12、+ 考察点：视紫红蛋白。相关内容：质子势能。13、+ 考察点：端粒酶的性质。教材内容：每条染色体末端进化形成了DNA序列及能够识别和结合端粒序列的蛋白质，这一种核糖核蛋白由RNA和蛋白质组成，称为端粒酶。具有逆转录酶的性质，其中RNA是富含G序列的模板，因此可以弯过来作为引物复制5’末端。14、+ 考察点：转录与反转录。教材内容：反转录酶催化的DNA合成反应要求有模板和引物，以四种脱氧核苷三磷酸作为底物，此外，还需要适当的阳离子（Mg2+、Mn2+）和还原剂（以保护酶蛋白中的巯基）DNA链的延长方向为5’→3’。RNA聚合酶需要以四种核苷三磷酸作为底物，并需要适当的DNA作为模板，Mg2+能促进聚合反应，RNA链的延长方向为5’→3’，反应是可逆的，但焦磷酸的水解可推动反应趋向聚合。相关内容：DNA的复制过程。15、- 考察点：前导链与滞后链。教材内容：以复制叉向前移动的方向为标准，一条模板链是3’ →5’走向，在其上DNA能以5’→3’方向连续合成，称前导链。另一条模板链是5’→3’走向，在其上DNA合成也是以5’→3’方向，但与复制叉移动的方向正好相反，所以，随着复制叉移动形成许多不连续的片段，最后连成一条完整的DNA链，称滞后链。相关内容：冈崎片段的概念及其大小变化。16、- 考查点：基因组的概念。教材内容：哺乳动物（包括人类）的C值均为109数量级（人为2.9×109），人们很难置信两栖类动物的基因组的功能比哺乳动物更复杂。相关内容：C值概念与C值矛盾。17、+ 考察点：细胞器的增殖。18、- 考察点：转录的终止。教材内容：在转录过程中，RNA聚合酶沿着模板链向前移动，它只能感受正在转录的序列，而不能感受到未转录的序列，即终止信号应位于已经转录的序列中。所有原核生物的终止子在终止之前有一个回文结构，其产生的RNA可形成茎环构成发卡结构，该结构可使聚合酶减慢移动或暂时停止RNA的合成。相关内容：转录全过程与转录因子。19、- 考察点：hnRNA的概念，特性。教材内容：真核生物mRNA的原初转录产物是分子量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间物称hnRNA。hnRNA的碱基组成与总的DNA的组成类似，因此，又称为类似DNA的RNA（D-RNA），它们在核内迅速合成又迅速降解，其半衰期短，比胞质成熟mRNA更不稳定。不同细胞类型的hnRNA半衰期不同，一般在几分钟至1小时左右，而胞质成熟mRNA的半衰期一般在1-10小时，神经细胞的mRNA的半衰期最长，可达数年。相关内容：真核mRNA前体（hnRNA）的加工。20、+ 考察点：DNA复制的调控。教材内容：基因组能独立进行复制的单位称复制子（replicon），每个复制子都含控制复制起始的起点（origin），可能还会有终止复制的终点（termionus）。复制是在起始阶段进行调控的，一旦开始，它即继续下去，直至整个复制子完成复制。相关内容：转录、翻译的调控。
二、选择题
1、C ；2、B 考察点：氨的转运、尿素循环。教材内容：谷氨酰胺是中性的无毒物质，容易透过细胞膜。是氨的主要转运形式。3、D考察点：信号肽引导的蛋白质转运。教材内容：信号识别颗粒（SRP）是一种核糖核酸蛋白复合体，它能识别正在合成并将通过内质网膜的蛋白质的自由核糖体，它与这类核糖体的信号肽结合后，肽链合成暂时终止，SRP对于正在合成的其它蛋白质无影响。4、A 考察点：微管蛋白的成分、结构。教材内容：α-微管蛋白和β-微管蛋白形成的微管蛋白异二聚体，是微管装配的基本单位，微管蛋白异二聚体含有GTP的两个结合位点，二价阳离子亦能结合于微管蛋白二聚体上。5、D 考察点：基因剔除的概念。相关内容：基因的研究方法分类。6、C 考察点：胰凝乳蛋白酶的结构。教材内容：胰凝乳蛋白酶（chymoriypsin）是研究的最早最彻底的一个酶，它的活性中心由Ser105His57Asp102组成，分子量为25000。7、D 考察点：别构酶调节酶活性的机理。教材内容：序变模型（KNF模型）主张酶分子中的亚基结合小分子物质（底物或调节物）后，亚基的构象逐个变化。因此，亚基有各种可能的构象状态。当底物（或正调节物）浓度上升，升到可与其中一个亚基牢固的结合时，这时，剩下的亚基就会改变构象，形成一个有活性的四聚体，，给出S型动力学曲线。在序变模型中，既有正调节物分子的作用，又有负调节物分子的作用，第二种分子与酶的结合可能比第一种分子与酶的结合更紧密些。这取决于第一种分子结合所引起的形变。齐变模型（MWC模型）主张别构酶有所得亚基或者全部是坚固紧密的，不利于结合底物的“T”状态，或者全部是松散的，利于结合底物的“R”状态。这两种状态间的转变对于每个亚基都是同步的，齐步发生的，“T”状态中的亚基的排列是对称的，变成“R”状态后，蛋白亚基的排列仍是对称的。正调节物（如底物）与负调节物的浓度比例决定别构酶究竟处于何种状态。当无小分子调节物存在时，平衡趋向于“T”状态；当有少量底物时，平衡即向“R”状态，当构象转变为“R”状态后，又进一步增加了对底物的亲和性，给出了S型动力学曲线。目前认为，齐变模型不适用于负协调效应。8、B 考察点：TCA循环。教材内容：琥珀酸脱氢酶是TCA循环中唯一结合在线粒体内膜上并直接与呼吸链联系的酶。此酶为含铁的黄素蛋白酶，除含FAD辅基外，还含有酸不稳定的硫原子和非血红素铁，也称铁硫蛋白。9、D 考察点：米氏方程的应用。教材内容：V=Vmax[S]/(Km+[S])推出：V/Vmax=[S]/(Km+[S])，可以推知：[S]=99Km，相关内容：米氏方程的推导过程。10、B 考察点：Km 的应用。教材内容：同一酶有几种底物就有几个Km 值。Km 值大笑表示酶和底物的亲和力强弱，Km值笑表示酶和底物的亲和力强，其中Km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。11、C 考察点：氨基的转化。教材内容：NO的前体是精氨酸（arginine，Arg），在NO合成酶（NO systhase）作用下，Arg水解成瓜氨酸，释放NO，瓜氨酸在通过精氨酸代琥珀酸重新合成Arg。12、A 考察点：物质的过膜转运。相关内容：物质的跨膜转运的分类及特点。13、C 考察点：辅酶Q的结构。相关内容：辅酶Q是电子传递链中唯一的非蛋白组分，含有异戊二烯单位的醌单位。相关内容：辅酶Q的功能，电子传递链的组分。14、C 考察点：Na+，K+—ATP酶。教材内容：Na+，K+—ATP酶为分子Kdde四聚体（α2β2），其亚基约为95KD，是跨膜蛋白，在胞质侧有ATP酶活性位点，胞外侧只有K+和专一抑制剂乌本苷的结合位点，β亚基约为45KD的糖蛋白，Na+，K+—ATP酶将Na+泵出，将K+泵入细胞内，每水解1ATP向膜外泵出3Na+，向胞内泵入2K+。相关内容：细胞的跨膜电位。15、D 考察点：线粒体与氧化磷酸化。相关内容：悬浮的线粒体既无可氧化的底物又无ADP时为状态I，氧气利用极低。加入ADP后变为状态Ⅱ，有短暂的呼吸刺激。加ADP后又加底物为状态Ⅲ，ADP被耗尽，变为状态Ⅳ。氧气耗尽，线粒体无呼吸可言，为状态Ⅴ。16、D 考察点：端粒酶的结构、功能。17、D 考察点：信号肽假说。18、D 考察点：真核生物mRNA帽子的结构。教材内容：真核生物mRNA 5’末端有一个特殊的帽子结构，其组成为：5’m7G—5’—PPP—5’N1mP—。相关内容：真核生物mRNA帽子结构的功能。19、B 考察点：嘌呤环和嘧啶环的碳架结构。20、C 考察点：翻译起始。教材内容：对起始密码子附近的核苷酸序列进行分析后，发现在距离起始密码子上游（5’—端）约10bp处有一段富含嘌呤的序列（S-D序列），它与16SrRNA的3’端核苷酸序列形成碱基互补，正是由于S-D序列与16SrRNA的3’端核苷酸序列的这种相互作用，使得核糖体能区别起始信号AUG与编码肽链中的Met密码子AUG，正确的定位于mRNA上起始信号的位置。21、C 考察点：DNA甲基化对基因表达的影响。教材内容：DNA甲基化的作用有：影响DNA与蛋白质的相互作用与识别；改变DNA的构象，如形成Z—DNA等。22、C 考察点：遍在蛋白的功能。教材内容：真核细胞的胞质基质中，有意复杂机制识别蛋白N端的不稳定氨基酸信号，并准确的将它降解。泛素是其中之一，它是76氨基酸的小分子蛋白，有多种功能。23、A 考察点：光修复作用。教材内容：可见光激活了细胞内的光裂合酶，使之与嘧啶二聚体结合，并将其分开，恢复为两个单独的嘧啶碱基。相关内容：DNA损伤的修复。24、C 理由：λ噬菌体50个基因，其中决定λ噬菌体溶原与裂解的调节基因有6个：N、Q、Cro、cⅠ、cⅡ、cⅢ，其中Cro蛋白的功能是抑制溶原性阻遏蛋白cⅠ的生成，从而使λ噬菌体进入裂解循环。25、C 考察点：细胞器复制。相关内容：D—环复制的特点。
三、填空题
1、与Ser、Thr、Hyl的-OH连接的O-糖苷链、与Asn、Lys、Arg远端氨基连接的N-糖苷链。2、二硝基苯基氨基酸、DNB氨基酸、氨基。3、正协同性。4、组氨酸、胰凝乳蛋白酶。5、环戊烷多氢菲。6、钙离子。7、呼吸控制率。8、7次跨膜。9、高。10、UCA UCC UCU。11、特异的核酸内切酶 核酸外切酶 DNA聚合酶 DNA连接酶。12、螺旋-转角-螺旋 螺旋-环-螺旋 亮氨酸拉链
四、问答题
1、考察点：蛋白质的性质、蛋白质分析。题中的肽段降解得三段肽段。
⑴溴化氰（cyanogen bromide）它只断裂Met残基的羧端肽键。也可以选用糜蛋白酶或嗜热菌蛋白酶，但其专一性不如溴化氰。⑵可以用沉降速度法、凝胶过滤法、SDS-PAGE等将它们分开。⑶用沉降速度法、凝胶过滤法加一个分子量标准，就可以测定片段的分子量。⑷将酶切蛋白肽段与蛋白一起做凝胶电泳，计算肽段的分子量之和。与蛋白的分子量相等，就可以说明这些肽段就来自于该蛋白质。⑸分别测定片段、蛋白质的末端残基，经过比较，就可以依次确定肽段的排列顺序。
2、考察点：PH对酶活力的影响。
大部分酶的活力受其环境PH的影响。在一定PH下，酶反应有最大速度，高于或低于这个PH，反应速度下降。通常称此PH为酶反应的最适PH（optimum PH）。它因底物种类、浓度、缓冲液的成分不同而不同具体的讲，PH酶活力的影响主要在以下几个方面：①过酸、过碱会影响酶蛋白的构象，甚至使酶失活②PH改变不剧烈时，酶虽然不变性但活力受影响。原因是PH影响底物分子、影响酶分子的解离状态及它们的结合状态③PH影响分子中另一些基团的解离，它们的离子化状态与酶的专一性及酶分子的活性中心有关。
3、考察点：物质的跨膜运输。
三种物质的跨膜运输的特点有：①被动运输 物质从高浓度的一侧到底浓度的一侧。物质的运输速度既依赖于膜两侧的运输物质的浓度差，由于被运输物质的分子量大小、电荷、在脂双层中的溶解度等有关。②促进扩散顺浓度梯度扩散，有专一蛋白的结合。有饱和效应，对浓度差、在脂双层中的溶解度等的依赖均不如被动运输那么强烈。③主动运输 逆浓度梯度，由膜蛋白参与的耗能过程。特点有：有运输物质的专一性；运输的速度有最大值；运输过程有严格的方向性；被选择性的抑制剂如乌本苷专一抑制；整个运输过程需要提高大量的能量。
4、考察点：蛋白质序列与其基因序列存在的不对应关系。
蛋白质序列与其基因序列存在的不对应关系，在如下的一些情况中有所体现：⑴基因序列内的内元、调节序列等均不编码蛋白序列，不能实现基因序列到蛋白质序列的转化。因而就无序列对等可言。⑵三联体密码本身的简并性、摇摆性等因素使得基因序列到蛋白质序列的转化不如复制或转录那么精确，序列自然就出现不对等。⑶无义密码子的存在，为引进稀有氨基酸提供了机会。出现了序列不对等。⑷三联体密码本身不是绝对通用的，所以基因序列到蛋白质序列的转化会出现序列不对等。⑸在翻译过程中，tRNA的反密码子与密码子配对时的不严格的3-3配对，使得序列出现不对等的情况。
5、考察点：干扰素的概念及其研究。
动物机体内细胞在病毒或其他诱导物作用下所产生的能够抑制病毒增殖的一类低相对分子质量的可溶性蛋白质。等电点为6.5左右，对热不敏感，PH为2-11范围内保持稳定，抗原性弱，不能透析，可被蛋白酶破坏。干扰素作用于人和动物细胞后，使这些细胞产生了广谱性的抗病毒增殖、抗肿瘤生长和免疫调节剂等作用。起作用机理是在细胞内诱导产生另一种能够阻断病毒信使RNA转译的抑制性蛋白。干扰素现实种属特异性型，但对病毒的抑制有广谱性。正常细胞内的干扰素生成系统，在一般生理状态下，呈静止状态，只有在一定的诱导物作用下，才开始诱导生成干扰素。合成干扰素的诱导物有：①DNA或RNA病毒，也包括某些失活的病毒粒子②复杂的多糖、内毒素、双链RNA，如聚（I：C）③某些细菌和立克次氏体属的一些种。在刺激后的几分钟内，就可以产生干扰素。中国科学家于1982年研制成功基因工程的IFN，并诞生了第二代IFN，使α型干扰素与基因工程IFN于1989年获准投入市场。γ-干扰素是由活化的T细胞所分泌的淋巴因子，能对许多细胞产生广泛的效应。其主要作用有：抑制病毒在多种细胞中的复制，诱导内皮细胞、上皮细胞、结缔组织细胞中Ⅱ类组织相容性分子的表达，使这些细胞在抗原呈递中活化，激活巨噬细胞增强其抗微生物和抗肿瘤活性，提高FCγ受体的表达，抑制细胞生长，诱导许多骨髓细胞系分化。人的γ-干扰素基因位于第12对染色体的长臂上。
中科院2000生化与分子
一.是非题，每题1分，共20分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”。
1、肌红蛋白和血红蛋白的亚基在一级结构上具有明显的同源性，它们的构想和功能也很相似，因此这两种蛋白质的氧结合曲线也是十分相似的。
2、抗体酶是只有催化作用的抗体。
3、除单独含有RNA或DNA的病毒外，还存在同时含有RNA和DNA的病毒。
4、二硫键既可用氧化剂，也可用还原剂进行断裂。
5、根据米氏方程，转换数Kcat值与越大的酶反应速率越大。
6、米是常数Km值是一个与酶浓度无关的特征常数，但表观Km值受酶浓度的影响。
7、对一个正协同别构酶而言，当增加正调节物浓度时，协同性减少。
8、到目前为止发现的所有具有七次跨膜结构特征的受体都是G蛋白偶联受体。
9、线粒体ATP合成酶与叶绿体ATP合成酶的结构与功能是十分相似的
10、辅酶Q是细胞色素b的辅酶。
11、缬氨酸素是呼吸链复合物Ⅲ的抑制剂。
12、磷脂水溶液经超声波处理后可以生成脂质体。
13、端粒酶是一种转录酶。
14、基因表达的最终产物都是蛋白质。
15、DNA复制时，前导链上的合成方向是5’→3’，后随链上的合成方向是3’→5’。
16、DNA复合酶和RNA聚合酶的催化作用都需要引物。
17、真核生物的启动子有些无TATA框，这将使转录有不同的起始点。
18、细胞内的DNA分子两条链，在特定的区域内，只有一条链被转录，对应的链只能进行复制，而无转录功能。
19、感染大肠杆菌的病毒有双链核酸（DNA或RNA）。
20、细菌处于贫瘠的生长条件下，与其他RNA相比，mRNA合成下降最为明显。
二、选择题：25题，共25分。
1、蛋白质的别构效应
A．总是和蛋白质的四级结构紧密联系的 B．和蛋白质的四级结构无关
C．有时和蛋白质的四级结构有关有时无关
2、蛋白质磷酸化是需要
A．蛋白质水解酶 B．蛋白质激酶 C．磷酸化酶
3、蛋白质是两性介质，当蛋白质处于等电点时，其
A．溶解度最大 B．溶解度最小 C．和溶解度无关
4、青霉素是一种
A．酸 B．碱 C．糖 D．肽
5、针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是
A．凝胶过滤 B．离子交换层析 C．亲和层析
6、根据国际系统命名法原则，以下哪一个有可能是蛋白激酶的编号
A．EC2.7.1.126 B．EC3.7.1.126 C．EC4.7.1.126 D．EC6.7.1.126
7、在酶的抑制作用中，抑制50%活力时的抑制剂浓度等于Ki值适用于
A．竞争性抑制 B．非竞争性抑制 C．不可逆抑制 D．所有可逆性抑制
8、磷酸果糖激酶2（6-磷酸果糖-2-激酶）和果糖2-磷酸酶2（果糖-2，6-二磷酸酯酶）两种酶是
A．同工酶，两个不同蛋白质催化同一反应 B．两个不同蛋白质催化不同反应
C．一个双功能酶，同一个蛋白质具有两种酶活性
9、胰岛素对代谢的影响表现为
A．降低血糖，增高糖原合成速度，但也降低脂肪酸合成速度
B．降低血糖，增高脂肪酸合成速度，但也降低糖原合成速度
C．降低血糖，增高糖原合成速度，但也降低蛋白质合成速度
D．降低血糖，，增高糖原、脂肪酸和蛋白质合成速度
10、酮体是指
A．丙酮、乙酰乙酸和α酮戊二酸 B．丙酮酸、乙酰乙酸和α酮戊二酸
C．丙酮、乙酰乙酸和β羟丁酸 D．丙酮酸、乙酰乙酸和β羟丁酸
11、生物膜的厚度在
A．0.6nm左右 B．6nm左右 C．60nm左右 D．600nm左右
12、完整线粒体呼吸受寡霉素抑制后，下述分子中有一种不能解除抑制，它是
A．2，4-二硝基苯 B．Ca2+ C．K+短杆菌肽 D．还原性细胞色素C
13、Triton X-100 是一种
A．Ca2+螯合剂 B．蛋白酶抑制剂 C．去垢剂 D．脱氢酶抑制剂
14、细菌视紫红蛋白与视网膜视紫红蛋白的相似点在于
A．蛋白质的一级结构 B．都以11-顺视网醛为辅基 C．都能导致质子跨膜位移 D．都与G蛋白有关
15、细胞质中一分子NADH氧化生成二分子ATP，线粒体内一分子NADH氧化生成三分子ATP，这是因为
A．胞质NADH通过线粒体内膜时消耗ATP
B．胞质NADH从胞质中NAD+-联系的脱氢酶上解离需要ATP
C．胞质NADH不能直接被线粒体氧化，需要胞质中与线粒体上的甘油-3-磷酸脱氢酶的帮助
D．胞质NADH需转变成NADPH后才能进入线粒体
16、逆转录酶（反转录酶）是一种
A依赖DNA的DNA聚合酶 B．依赖DNA的RNA聚合酶 C．依赖RNA的DNA聚合酶D．依赖RNA的RNA聚合酶
17、细胞核内DNA生物合成主要是在细胞周期的哪一期进行
A．G1期 B．S期 C．G2期 D．M期
18、一寡聚合糖核苷酸片段AGUGGCCA，经RNaseT完全酶解得到产物有
A．5种 B．2种 C．3种 D．4种
19、Western印记是一种研究什么转移的鉴定技术
A．DNA B．RNA C．蛋白质 D．糖类
20、RNase H能特异切割
A．双链DNA B．双链RNA C．RNA-DNA杂交链中的DNA D．RNA-DNA杂交链中的RNA
21、原核生物的转录终止子在终止点前均有一个茎环结构，不依赖于rho（ρ）因子终止子的茎环结构中通常有一段GC丰富区，并在终止点前有一段什么序列
A．多聚腺苷酸 B．寡聚脲苷酸 C．AT丰富 D．含有修饰碱基的核苷酸
22、在信号肽的C端有一个可被信号肽酶识别的位点，此位点上游有一段什么的五肽
A．富含碱性氨基酸 B．富含酸性氨基酸 C．疏水性较强 D．亲水性较强
23、参与重组修复的酶系统中，具有交换DNA链活力的是
A．Rec A 蛋白 B．Rec B 蛋白 C．Rec C 蛋白 D．DNA聚合酶Ⅰ
24、下列化合物能与DNA结合，使DNA失去模板功能从而抑制复制和转录的是
A．5-氟尿嘧啶 B．放线菌素 C．利福霉素 D．α-鹅膏蕈碱
25、一碳单位在生物代谢起重要作用，一碳单位的转移载体是
A．辅酶A B．S-腺苷甲硫氨酸 C．维生素B12 D．四氢叶酸
三、填空题：
1、免疫球蛋白分子是由 条一样的轻链和重链组成，它们之间共有 对二硫键来维持整个分子。
2、稳定原胶原的三股螺旋的力有 和 ，此外，其氨基酸三联体的第三个位置必须是 。
3、PH对酶活力的影响除过酸、过碱导致酶变性而失活外，主要是通过影响酶活底物分子的 。
4、一个Kcat型不可逆抑制剂所具有的主要结构特征是 和 。
5、蛋白质（酶）的分离纯化主要依据蛋白质的分子大小、电荷、 和 等性质的差异。6、脂双层膜的流动性主要取决于磷脂的 与 。
7、琥珀酸脱氢氧化生成 。
8、糖蛋白中O糖肽键是指糖与蛋白质的 。
9、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ是一个多功能酶，除了聚合活性外，还兼有下列两种酶活性 和 。
10、一个tRNA的反密码子为IGC，根据简并原则，它可识别的密码子是 、 、 。
11、细菌的DNA螺旋酶是一种类型Ⅱ的拓扑异构酶，它可以连续引入 到双链闭环DNA分子中去，反应需要由ATP供给能量。在无能量供应时它可起 作用。
12、致癌RNA病毒和肝炎DNA病毒都含有 酶，它们的复制过程，前者为 后者为 。
四、问答题：5题，共30分。
1、指出从分子排阻层析柱上洗脱下列蛋白质时的洗脱顺序，为什么？分离蛋白质的范围是5000到400000。A。肌红蛋白（分子量16900Da）B。过氧化氢酶（247500Da）C。细胞色素C（13370Da）D。肌球蛋白（500000Da）E。胰凝乳蛋白酶原（23240Da）F。血清清蛋白（68500Da）
2、简要说明可用于判断和确定酶活性中心的一些主要方法。
3、试用少于100字描述线粒体F1-ATP酶的催化机制的特点。
4、转录后加工是基因表达中一个非常重要的步骤，试举出六种RNA水平的加工方式。
5、简要说明细胞内蛋白质选择性降解的作用机制。
中科院2000年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、-2、+3、-4、+5、-6、-7、+8、-9、+10、-11、-12、+13、+14、-15、-16、-17、+18、+19、-20、-
二、选择题
1、C；2、B；3、B；4、A；5、C；6、A；7、B；8、C；9、D；10、C；11、B；12、D；13、C；14、B；15、C；16、C；17、B；18、D；19、C；20、D；21、B；22、C；23、A；24、B；25、D。
三、填空题
1、2.2；2、氢键、范德华力、甘氨酸；3、解离状态；4、底物类似物、潜伏共价修饰酶的基团存在；5、疏水性、活性；6、脂肪酰链的长度、脂肪酰链的不饱和度；7、延胡索酸；8、丝氨酸/苏氨酸残基、天冬酰胺残基；9、3’→5’核酸外切酶、5’→3’核酸外切酶；10、GCA、GCC、GCU；11、负超螺旋、松弛负超螺旋；12、RNA→DNA→RNA、DNA→RNA→DNA。
四、问答题
1、凝胶过滤时，大分子不能进入分离介质，故而先被洗脱。因此，这组蛋白质洗脱的顺序是：D、B、F、E、A、C。注意：分离分析柱应有一定的分离效率，否则，A和C不易分离。
2、首先，可以通过酶的最适PH推断有哪些可电离的基团存在于酶的活性部位。其次，可以通过一些常用的化学修饰试剂处理酶制剂，观察酶是否失活。然而，应该注意的是需同时观察处理后酶的立体结构是否发生变化，以便了解是由于修饰引起了蛋白质变性而导致酶失活，还是有关活性部位中的氨基酸残基被修饰的结果。第三，在知道了酶的氨基酸序列后，一方面可以利用生物信息的方法，与同源的蛋白质进行比较，得到信息；还可以通过定点突变的方法改变某些氨基酸残基。第四，如果能得到酶与底物复合物的晶体，进行X射线衍射研究，则可以得到更为直接的结论。
3、F1-ATP酶γ与е亚基在α3β3的中央结合形成“转子”，共同旋转以调节β三个亚基催化位点的开放和关闭，g亚基的顺时针与逆时针分别与ATP的合成和水解相关联。F1-ATP酶直径小于12nm，能产生大于100pN的力，无载荷时转速可达17转/秒。F1-ATP酶与纳米机电系统（nanoNEMS）的组合成为新型纳米机械装置。
4、RNA水平上后加工的方式有：⑴剪切——除去有内含子转录得到的间插序列⑵编辑——某些生物需要改变原来的编码信息⑶修饰——许多功能RNA，尤其是tRNA含有修饰核苷酸⑷5’加帽——只要指真核生物mRNA的5’帽子结构⑸3’结尾——如真核生物mRNA的聚腺苷酸尾⑹剪切——通常转录得到的初级转录产物是分子很大的RNA前体，需要经过许多酶切才能到到一定长度的功能RNA分子。
5、在细胞质内存在一个蛋白酶体，它的功能是降解那些被认为应该被降解的蛋白质或肽链，也被称为“宣布无用的蛋白质”。这样的蛋白质包括新生肽链错误折叠的产物、一些已经完成“任务”的短寿命的蛋白质等。它们的讲解过程不同于溶酶体中蛋白质的降解，即不是直接被蛋白酶水解，而是现被标记，注明是应该被降解的蛋白质。这些被降解的蛋白质的标记过程是一个需能反应，在3个酶——遍在蛋白活化酶、遍在蛋白携带蛋白、遍在蛋白-蛋白连接酶的作用下，这些“宣布无用的蛋白质”中某些赖氨酸的e氨基与遍在蛋白形成异肽键。然后，在蛋白酶体中降解。
中科院2001生化与分子
一.是非题，每题1分，共25分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”。
1. 所有α氨基酸中的α碳原子都是一个不对称的碳原子( )
2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )
3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( )
4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )
5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( )
6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )
7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( )
8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )
9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( )
10. 脂质体的直径可以小到150nm( )
11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( )
12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )
13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( )
14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( )
15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( )
16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( )
17. 真核生物mRNA两端都含有3'-OH.( )
18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( )
19. 所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3'-羟基上( )
20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( )
二.选择题(20题，每题1分，共20分)
1. 绒毛膜促性激素是一种：
A. 甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素
2,溴化氰(CNBr)作用于：
A. 甲硫氨酰-X B. 精氨酰-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸
3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力：
A. ATP酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶
4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成：
A. αα B. ββ C. α2βγ2
5.胰岛素原是由一条"连接肽"通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条"连接肽"称为：
A. A链 B. B链 C. C肽
6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为：
A. Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km
7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶：
A. 由低活性形式变为高活性形式 B. 由高活性形式变为低活性形式 C. 活性不受影响
8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于：
A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能
C. 增加的结合能被用来降低Km D. 增加的结合能被用来增大Km
9.TGFβ受体具有下列哪一种酶的活性：
A. 酪氨酸激酶 B. 酪氨酸磷酸酯酶 C. 丝氨酸/苏氨酸激酶 D. 腺苷酸环化酶
10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关:
A. 结构生理学 B. 发育生理学 C. 神经生物学 D. 免疫学
11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在：
A.钠钾ATP酶B.线粒体ADP-ATP载体C.蛋白激酶C D.线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶
12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过：
A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal氏力
13.生物膜的基本结构是：
A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质 B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间
C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧
D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中
14.辅酶Q是：
A. NADH脱氢酶的辅基B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基D.脱羧酶的辅酶
15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达：
A. 1mv B. 10mv C. 100mv D. 200mv
16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做：
A. 有义链B. 反义链C. 重链D. cDNA链
17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷):
A. 3个 B. 4 C. 5 D. 6
18.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是：
A. 核小分子RNA(sn RNA) B. 核仁小分子RNA(sno RNA) C. 核不均一RNA(hnRNA)
19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是：
A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成 B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成
C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解
20.α-鹅膏覃碱能强烈抑制：
A. 细菌RNA聚合酶 B. 真核RNA聚合酶 C. 细菌DNA聚合酶 D. 真核DNA聚合酶
21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关?
A. ATP的水解 B. GTP的水解 C. Camp的水解 D. 烟酰胺核苷酸参与
22. 基因重组就是DNA分子之间的:
A. 共价连接 B. 氢键连接 C. 离子键连接
23. DNA复制过程中双链的解开,主要靠什么作用：
A. 引物合成酶 B. Dnase I C. 限制性内切酶 D. 拓扑异构酶
24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因组计划,到目前为止的进展情况如何?
A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱
B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列
C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列,但只是一部"天书",无法知道它的全部意义
D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,已经了解大部分基因的功能
25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是:
A. 磷酸吡哆醛 B. 泛酸 C. 烟酰胺 D. 硫氨素
三、填空题(每空一分)
1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为__________然后是胰岛素的前体,称为_________
2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种____结构,其中每一股又是一种特殊的____结构.
3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____
4. "蛋白质组"是指____________________
5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是__________,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_______作为专一激活因子
6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有______________,__________________等(仅写两个)
7. 霍乱毒素的受体是一种____________化合物
8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________
9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_____________
10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离____于后者;前者的直径___于后者
11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有___________和____________活性
12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与___和___氨基酸代谢有关.
13. 大肠杆菌的启动子序列包含有___________,_______________及____________等信息.
14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须__________,才能发生病毒的复制.
15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞__________中,合成大分子核糖体RNA前体
四.问答题(5X6)
1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段?(仅需写出阶段名称)
2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解.
3. 写出核酸降解的主要步骤（A卷）
4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接
5.真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？
中科院2001年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、-2、-3、-4、+5、-6、+7、-8、-9、+10、-11、+12、+13、+14、+15、-16、-17、+18、+19、-20、-
二、选择题
1、C；2、A；3、A；4、B；5、C；6、B；7、A；8、B；9、C；10、C；11、B；12、B；13、D；14、B；15、D；16、A；17、A；18、B；19、B；20、B；21、B；22、A；23、D；24、C；25、A
三、填空题
1、前胰岛素原、胰岛素原；2、三条肽链组成的右手螺旋、左手螺旋；3、Kcat、自杀性底物；4、生物体所拥有的全套蛋白质或基因组所编码的全部蛋白质；5、二酰基甘油、Ca2+；6、细菌视紫红质、孔蛋白；7、糖脂类；8、α3β3γеd；9、脂肪酰链的不饱和度；10、大、小；11、RIP、磷酸二酯酶、N-糖苷酶；12、PRPP、组氨酸、色氨酸；13、操纵基因结合、RNA聚合酶结合、转录起始；14、整合人宿主染色体；15、核仁
四、问答题
1、⑴肽链的选择性断裂，用特异性较强的蛋白酶或化学试剂⑵对得到的肽链进行分离⑶分别测定每个肽段的氨基酸序列⑷用另一种方式断裂台联，并重复前三个步骤，测定另一组肽段的氨基酸序列⑸利用两组肽段的序列，进行重叠从而得到肽链的全序列。
2、在低温进行蛋白质（包括酶）的分离纯化，既可以防止蛋白质的变性而失活，又可以避免长菌而污染。但有些寡聚蛋白在低温时，反而会解聚而失活。特别是一些热稳定的酶的疏水作用可能起到相当重要的作用。因此在防止微生物污染的前提下，应该避免使用低温条件。
3、核酸→寡核苷酸→核苷酸→核苷→碱基+戊糖-1-磷酸
⑴ ⑵ ⑶ ⑷
催化⑴的是核酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶或磷酸二酯酶；催化⑵同⑴；催化⑶的是核苷酸酶；催化⑷的是核苷磷酸化酶。
4、剪切是指删除由基因中的内含子转录和翻译产生的非编码功能序列，是转录后加工和翻译后加工的非常重要而不可缺少的步骤。已知多数情况下在RNA水平上的删除叫RNA剪切，在蛋白质水平上的删除叫蛋白质剪切。蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件，它将插入前体蛋白的中间的蛋白质肽段（Intein，internal protein fragment）剪切出来，并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链（Extein，flanking protein fragments）连接起来。在此过程中不需要辅酶或辅助因子的作用，仅需四步分子内反应。Intein 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用于蛋白质纯化、蛋白质连接和蛋白质环化反应，在蛋白质工程方面有广泛的应用前景。
5、真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。
RNA聚合酶Ⅰ存在与核仁中，其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。
RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。
RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。
相关内容：原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。
中科院2003生化与分子
一.是非题（共25分）
1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链（）
2.分子量相同的两种蛋白质，如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同，，其摩尔消光系数可能不同（）
3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右（）
4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸（）
5.丝-酪-丝-甲硫-谷-组-苯丙-赖-色-甘十肽经胰蛋白酶部分水解后，溶液中将有两种肽段存在（）
6.核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时，是从正极向负极运动的（）
7.核糖体上蛋白质生物合成时，催化肽键合成的是核糖体RNA()
8.tRNA转录后加工有剪接反应，它是有蛋白质催化的（）
9.核酸降解成单核苷酸时，紫外吸收值下降（）
10.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA()
11.DNA的复制方法有多种，滚动式复制方式通常以双向方式进行（）
12.色氨酸操纵子（trpoperon）中含有衰减子序列（）
13.对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录（）
14.RecA蛋白只能与单链DNA结合，并发挥NTP酶活性（）
15.在克隆载体pBSK质粒中，利用完整的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断（）
16溶菌酶水解的底物是N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物（）
17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域（）
18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下，酶催化反应为零级反应（）
19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团（）
20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关（）
21.心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂（）
22.生物膜上有许多膜固有蛋白，他们的跨膜肽段大多呈α螺旋结构（）
23.生物膜以脂双层结构为骨架，虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成，但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的（）
24.NADH氧化时的P/O比值时3（）
25.生物膜是离子与极性分子的通透屏障，但水分子是例外（）
二.选择题（共20分）
1.胰岛素的功能单位是
A单体； B二体； C四体； D六体
2.1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为
A 2； B 3； C 6； D 8
3.某蛋白质的pI为8，在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为
A。像正极方向泳动；B没有泳动；C向负极方向泳动；D向正负极扩散
4.今有A,B,C,D四种蛋白质，其分子体积由大到小的顺序是A>B>C>D,在凝胶过滤柱层析过程中，最先洗脱出来的蛋白质一般应该是
A A; B B; C C; D D
5.噬菌体展示可用来研究
A蛋白质-蛋白质相互作用； B蛋白质-核酸相互作用； C核酸-核酸相互作用； D噬菌体外壳蛋白性质
6.DNA合成仪合成DNA片断时，用的原料是
A 4种dNTP; B 4种NTP; C 4种dNDP; D4种脱氧核苷的衍生物
7.酒精沉淀核酸时，下列何种长度核苷酸不能被沉淀
A10； B20； C50； D100
8.反密码子IGC可以识别的密码子是
A。GCG; B。GCA; C。ACG; D。ICG
9.真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是
A磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离，促进转录的起始与延伸；
B乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上，促进转录的起始与延伸；
C甲基化使RNA聚合酶2活化，促进转录的起始与延伸；
D三者都有
10.GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录，它的DNA结合结构域属于
A锌指结构； B亮氨酸拉链结构； C螺旋-环-螺旋结构； D螺旋-转角-螺旋结构
11.RNA聚合酶1的功能是
A转录tRNA和5sRNA基因； B转录蛋白质基因和部分snRNA基因；
C只转录rRNA基因； D转录多种基因
12.在真核细胞内，着丝粒是指
A两个构成染色体DNA分子的连接区域；
B一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区；
C染色体DNA上的一段特殊序列，能够促进与纺锤体的相互作用；
D大约430bp长的一段序列，两端为两段高度保守的序列
13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应
A羧肽酶Y; B胃蛋白酶；C木瓜蛋白酶；D胰凝乳蛋白酶
14.达到反应平衡时，决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是
A酶的比活力高低； B酶的Vmax大小； C酶的转化数； D酶的Km
15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质，其中含量最高的是
A淀粉； B木质素； C纤维素； D半纤维素
16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是
A枯草杆菌蛋白酶； B胃蛋白酶； C嗜热菌蛋白酶； D金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶
17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂
A氯霉素； B抗酶素A; C2,4-二硝基苯酚； Dβ-羟基丁酸
18.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化，它是
A酪氨酸残疾； B组氨酸残基； C丝氨酸残基； D门冬氨酸残基
19.钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时，同时
A泵出2Na+,泵入2K+; B泵出3Na+，泵入3K+; C泵出2Na+,泵入3K+; D泵出3Na+，泵入2K+;
20.动物细胞质中游离Ca2+的浓度大约是细胞外的
A 1/1000； B 1/200； C 1/50； D 1/10三.填空（共25分）
1.肌红蛋白分子中的辅基含有 离子（金属），在正常状态下，该离子的化合价为 。
2.在朊病毒致病过程中，其分子中的 结构转变为 结构，从而使其分子产生 。
3.Northern杂交是用 鉴定 。
4.真核生物主要有三类DNA聚合酶：DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶 ；他们分别催化rRNA,mRNA,和 的转录。
5. 通过结合反式因子，改变染色质DNA的结构而促进转录。
6.λ噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过 重组而进入溶源状态。
7.在同源重组过程中，常常形成 中间体。
8.大肠杆菌DNA依赖的RNA聚合酶由α2ββ‘σ五个亚基组成， 亚基与转录启动有关。
9.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片断发生连接，这是因为天然染色体的末端存在 结构。
10.真核生物的基因组中有许多来源相同，结构相似，功能相关的基因，这样的一组基因称为
11.酶活性调节控制包括，酶的别构调节（或正负反馈调节），可逆的化学修饰，酶原活化，激活蛋白或抑制蛋白的调控。此外，还有 和 调控等。
12.多酶复合体具有自身调节的机制，第一步反应一般是限速步骤，可被其他反应产物 。这种作用被称之为 ，催化这步反应的酶往往是 。
13.紧密偶联的线粒体内膜在状态4时的跨膜电位为 伏特。
14.磷酸酯酶C水解磷脂酰胆碱，生成 和 。
15.蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是 。
16.表皮生长因子受体与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有 。
四.问答题（10×8）
1.某一单链蛋白质，经过实验测得，在20摄氏度时其解折叠反应（N<=>D,其中N为该蛋白质的折叠态，D为非折叠态）的平衡常数是1.0×10-8,试求该种蛋白质在该条件下折 叠反应的自由能.(R=1.9872cal/(mol×K)或R=8.3144J/(mol×K))
2.何谓蛋白质组，简述其研究特点。
3.请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类。
4.说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义.。
5.简述反转录（还原）病毒HIV的结构特征及其可能的致病机理。
6.简述真核生物染色体上组蛋白的种类，组蛋白修饰的种类及其生物学意义。
7.如何用实验证明双功能酶所催化的2种化学反应是否发生在同一催化部位。
8.为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的。
9.试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时，在分光光度计下检测到线粒体内源NAD+还原。这有那几种可能的机制？最后证明是何种机制。
10.信号转导中第二信使指的是什么？试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。
中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、- 多肽链的共价主链形式上都是单键；2、+；3、- 胰岛素无活性；4、+ 人体必需氨基酸有8种：亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸；5、+ 胰蛋白酶为蛋白水解酶，能选择的水解蛋白质中有赖氨酸或精氨酸的所及所构成的肽链；6、-；7、-；8、-；9、- 当核酸变性降解时，其紫外吸收强度显著增加，称为增色效应；10、+；11、-；12、+ 色氨酸操纵子转录的衰减作用是通过衰减子（attenuator）调控原件使转录终止。色氨酸操纵子的衰减子位于L基因中，离E基因5’端约30-60bp；13、-；14、-；15、+；16、+；17、-；18、+；19、- 蛋白质是两性电解质，分子中的可解离基团主要是侧链基团，也包括末端氨基和羧基；20、+；21、-；22、+；23、+；24、+ NADH经呼吸链完全氧化时P/O为3，即1分子的NADH通过呼吸链将电子最终传递给O2可产生3个ATP；25、- 离子和大的不带电荷的极性分子葡萄糖、蔗糖等不能通过生物膜，但是小的不带电荷的极性分子水、尿素、甘油等可以通过。
二、选择题
1、A；2、B；3、C；4、A；5、A；6、A；7、A；8、B 带有反密码子IGC的tRNA Ala分子可以与特异编码Ala的三个密码（GCU，GCC，GCA）中的任一个结合；9、A；10、A；11、C；12、C；13、C 木瓜蛋白酶是一种含巯基（-SH）肽链内切酶，具有蛋白酶酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯酰胺等有较强的水解能力，同时还具有合成的功能；14、C；15、A；16、D 葡萄球菌蛋白酶和梭菌蛋白酶是高专一性肽链内切酶。葡萄球菌蛋白酶亦称Glu（谷氨酸）蛋白酶，当在磷酸缓冲液（PH7.8）中进行裂解时，它能在Glu残基和Asp（天冬氨酸）残基的羧基端断裂肽键。如果改用碳酸氢铵缓冲液（PH7.8）或醋酸铵缓冲液（PH4.0）时，则只能断裂谷氨酸残基端的肽键。梭菌蛋白酶或称Arg蛋白酶，此酶专门裂解Arg残基的羧基端肽键；17、C；18、C 蛋白激酶A催化亚基可使细胞内某些蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化；19、D；20、A
三、填空题
1、亚铁、二价；2、α螺旋、β片层、构型变化；3、探针杂交、RNA；4、Ⅲ；5、顺式作用、元件；6、λDNA；7、Holliday；8、s；9、端粒；10、基因家族（gene family）；11、别构调节、激素调节；12、抑制、反馈调节、别构酶；13、3×105～4×105伏特；14、1，4，5-三磷酸肌醇（I3P）和二酰基甘油（）DAG；15、SH2；16、酪氨酸激酶。
四、问答题
1、△G’=RTlnK’=-2.303×8.3144×293lg10-8=103.35kJ
2、蛋白质组（proteome）指由一个基因组（genome），或一个细胞、组织表达的所有蛋白质（protein），蛋白质组学（peoteomics）是用二维电泳和质谱技术在蛋白质水平上定量、动态、整体性地研究生物体，是研究蛋白质组的技术。蛋白质组分析工作集中在两个方面：⑴通过二维胶电泳等技术得到正常生理条件下的机体、组织或细胞的全部蛋白质的图谱，相关数据将作为待测机体、组织活细胞的二维参考图谱和数据库。⑵比较分析在变化了生理条件下蛋白质组所发生的变化。蛋白质组学的研究内容包括：①蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。②研究翻译后修饰：对阐明蛋白质的功能具有重要作用。mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化、酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式。③蛋白质功能确定：如分析酶活性和确定酶底物，细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和翻译技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。④促进分子医学的发展：如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质，而很多药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。
3、核糖体RNA（rRNA）：核糖体组分。
信使RNA（mRNA）：蛋白质合成模板
转运RNA（tRNA）：转运氨基酸。
不均一核RNA（hnRNA）：成熟mRNA的前体。
小核RNA（snRNA）：参与hnRNA的剪接、转运。
小胞浆RNA（scRNA/7SL-RNA）：蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分。
microRNA：平均每个microRNA调解人类的200种不同的mRNA，并且多个microRNA能够协调它们的活动以调节一些特殊的靶标基因。
miRNA：主要功能是调节内源基因的表达，参与细胞周期的调控及个体发育过程。
导引RNA（gRNA）：mRNA编辑。
RNA聚合酶（RNA P）：tRNA加工。
核仁小分子RNA（snoRNA）：参与rRNA成熟加工（切割和修饰）。
SRP-RNA：参与蛋白质的分泌。
端粒mRNA：参与DNA端粒合成并影响细胞的寿命。
tmRNA：参与破损mRNA蛋白质合成的终止。
4、基因芯片工作原理：应用已知核酸序列作为靶基因与互补的探针核苷酸序列杂交，通过随后的信号检测进行定性与定量分析。具体讲是将许多特定的寡核苷酸片段或cDNA基因片段作为靶基因，有规律的排列固定于支持物上，样品DNA/RNA通过PCR扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子或反射性同位素作为探针然后按碱基配对原理将两者进行杂交，在通过荧光或同位素检测系统对芯片进行扫描，有计算机系统对每一探针上的信号作比较和检测，从而得出所需要的信息。
Schematic illustrantion of an HIV-1 virion.The viral particle is covered by a lipid bilayer that is derived from the host cell.
基因芯片技术应用领域主要有基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、药物筛选、基因测序等。另外基因芯片在农业、食品监督、环境保护、司法鉴定等方面都将作出重大贡献。随着研究的不断深入和技术的更加完善基因芯片一定会在生命科学院就领域发挥出其非凡的作用。
5、⑴HIV结构
gp120
gp41
核心：二两RNA链+逆转录酶+核心蛋白p17。P24
P24 capsid
外壳：来自宿主细胞脂膜+病毒编码糖蛋白（外膜gp120，跨膜gp41）。
Reverse
Transcriptase
RNA
Protease
Integrase
Lipid bilayer
HIV-1基因组9个：gag、pol、env编核心蛋白、逆转录酶、跨膜糖蛋白；Tat、rev、nef调控病毒复制；vif、vpr、vpu功能不清。无nef基因的HIV通过血液感染患者并为发展为AIDS，提示可将病毒调控蛋白（如nef编码蛋白）作为抗AIDS药物的靶点，或采用无关键调控蛋白的HIV突变体作为疫苗治疗AIDS。⑵HIV致病机理
①HIV感染CD4+T细胞：HIV-gp120+CD4+T细胞膜上CD4R+趋化因子受体CXCR4→HIV-RNA进入细胞内→反义DNA→双链DNA→与宿主基因整合→潜伏（前病毒）→被TNF、IL-6激活复制→入血→CD4+T细胞破坏。②HIV感染组织中单核巨噬细胞、树突装细胞：10-50%被感染HIV-gp120+MC-CD4R+共受体CCR5→HIV进入细胞HIV-Ab+（树突+MC）-Fc受体→HIV进入→大量复制→储存、释放。
6、真核生物染色体上组蛋白的种类包括H2A、H2B、H3、H4四种。组蛋白修饰包括：乙酰化、磷酸化、甲基化、泛素化以及ADP核糖基化等。
特定的组蛋白修饰与特定的基因激活化抑制状态相联系，组蛋白修饰在基因调控中发挥了重要作用。将有利于：①更好的开发新药。②深入探讨遗传调控和表观遗传调控相互作用的网络与不同生物学表型之间的关系。③在控制真核基因选择性表达的网络体系内进一步深入理解染色质结构、调控序列以及调控蛋白之间交互作用的内在机理。④建立基因表达的调控网络数据库及其分析系统。
7、⑴双功能酶⑵活性中心（或催化位点）的测定。
双功能酶：在生物体内共价修饰后有不同于未共价修饰的不同时的酶活性的酶。活性中心（或催化位点）的测定，对共价修饰的不同的酶与未共价修饰的用同样的方法测定活性中心（或催化位点）的测定看是不是一样。比如定点突变等。
8、主要从催化的酶、分子伴侣和其它分子的影响等几个方面组织答案。
9、氧化磷酸化的偶联机制的相关内容：①化学偶联假说：认为电子传递时ATP的合成是由化学能的直接转换，在电子传递时先生成不含磷酸的高能中间物，再转移成含磷酸的高能中间物，最后生成ATP②构象偶联假说：认为由电子传递所产生的能量的储存是通过一种电子传递蛋白或是偶联因素分子的构象变化而实现的。这种高能构象状态的产生是维持蛋白质三维构象的一些弱键（如氢键、疏水基团）的位置和数目发生变化的结构，这些弱键的数目和位置的变化是由能量变化引起的，这种高能结构中的能量即提供给ADP和无机磷酸形成ATP，同时能量携带蛋白又可逆的回到原来的低能状态③化学渗透假说（chemiosmotic hypothesis）：认为电子传递的结果将H+从线粒体内膜上的内侧“泵”到内膜的外侧，于是在内膜内外两侧产生了H+的浓度梯度。即内膜的外侧与内膜的内侧之间含有一种势能，该势能是H+返回内内膜内侧的一种动力。H+通过F0F1-ATP酶分子上的特殊通道又流回内膜的内侧。当H+返回内膜内测时，释放出自由能的反应和ATP的合成反应相偶联。
10、第二信使指能把激素或神经递质的信息传导细胞内，并引起相应生理效应的细胞内的某种化学物质至少有两个基本特性：①是第一信使同其膜受体结合后最早在细胞膜内侧或胞浆中出现、仅在细胞内部起作用的信号分子②能启动或调节细胞内稍晚内出现的反应信号应答。细胞内有五种最重要的第二信使：cAMP、cGMP、1，2-二酰甘油（DAG）、1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）、Ca2+等。①环磷腺苷（cAMP）：是ATP经AC作用的产物。β受体、D1受体、H2受体等激动药通过GS作用使AC活化，ATP水解而使细胞内cAMP增加。α受体、D2受体、MACH受体、阿片受体等激动药通过Gi作用抑制AC，细胞内cAMP减少。cAMP受磷酸二酯酶（PDE）水解为5’AMP后灭活。茶碱抑制PDE而使胞内cAMP增多。cAMP能激活蛋白酶A（PKA）而是胞内许多蛋白酶磷酸化（ATP提供磷酸基）而活化②环磷鸟苷（cGMP）：是GTP经鸟苷酸环化酶（GC）作用的产物，也受PDG灭活。cGMP作用与cAMP相反，使心脏抑制、血管舒张、肠腺分泌等。cGMP可以独立作用而不受cGMP制约。cGMP可激活蛋白酶G而引起各种效应③钙离子：对细胞功能有着重要调节作用，如肌肉收缩、腺体分泌、白细胞及血小板活化等。
中科院2004生化与分子
一.是非题：每题1.5分，共30分，答“是”写“+”,答“非”写“-”。
1. 目前已知的G蛋白都是由α和βγ亚基组成的.
2. 作为膜脂的鞘糖脂的功能主要与能量代谢有关.
3. 生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响.
4. 磷脂的代谢转化主要是与三酯酰甘油的合成和利用有关.
5. 人是最高等生物,其基因组的碱基对数目(2.9×109)是动物界中最大的.
6. 有两个核酸制剂A和B，A的A260/A280=2.0，B的A260/A280=1.5,因此可判定制剂A的纯度比制剂B的要高.
7. 真核生物mRNA的两端都有3'-羟基.
8. DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是5'→3'.而另一条链的合成方向为3'→5'.
9. 一个真核细胞内基因编码所用的密码子是通用的.
10. 人类基因组中有大量重复序列,如SINE,ALu等序列.
11. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的.
12. 在遗传作图中,1厘摩(cM)相当于1Mb的碱基长度.
13. 一个酶催化正反应和逆反应的Kcat或Km值可以不同,但Kcat/Km比值通常是相同的.
14. 信号肽的结构有一些特征,目前发现的信号肽序列都是位于多肽连的N端.
15. 构成淀粉,纤维素和半纤维素的基本单位都是葡萄糖.
16. ELISA和Western印迹两种方法都是应用抗体检测抗原的实验手段.
17. 生物膜的基本结构是脂双层.其中的二个单层的脂质组成大体上是相同的.
18. Na+,K+-ATP酶在水解1分子ATP时使2个K+由细胞外进入细胞内,同时使2个Na+由细胞内达到细胞外.
19. 脂质体不是一种细胞器.
20. 寡霉素是氧化磷酸化的抑制剂,既抑制呼吸也抑制磷酸化,但是它对呼吸的抑制可以被解偶联剂所解除.
二.选择题,每题1.5分，共45分.答案一律写在答题纸上。
1. 类二十碳烷(eicosanoid)的主要前体是
A.前列腺素; B.亚油酸; C花生四烯酸; D棕榈酸.
2.环加氧酶(cyclooxygenase)参与下述何种分子的合成?
A.白三烯; B.血栓烷; C.亚油酸; D,血小板活化因子.
3. 肌醇三磷酸(IP3)作用与受体,从而调节
A.G蛋白的活性; B.Ca2+通道; C.PKG的活性; D.腺苷酸环化酶的活性.
4. 磷脂酶D催化磷脂酰胆碱水解的产物是
A.二酯酰甘油; B.磷脂酸; C磷酸胆碱; D.溶血磷脂酸.
5. 一氧化氮(NO)受体是
A.G蛋白偶联受体; B.鸟苷酸环化酶; C.腺苷酸环化酶; D蛋白酪氨酸激酶.
6. 已知佛波醇酯(TPA)可以强烈地活化
A.蛋白酪氨酸激酶; B.G蛋白; C.蛋白激酶C; D.蛋白激酶B.
7. 能与DNA结合使DNA失去模板功能,从而抑制复制和转录的是
A.5-氟尿嘧啶; B.放线菌素; C.利福霉素; D.α-鹅膏蕈碱.
8. 氨基酸在叁入肽链前需要被ATP活化,氨基酸活化的场所是
A.内质网; B.线粒体; C.核糖体; D.细胞质.
9. 真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接的方式是
A.2'-5'; B.3'-5'; C.3'-3'; D.5'-5'.
10. 与tRNA中的反密码子为GCU相配对的mRNA中的密码子是 A.UGA; B.CGA; C.AGU; D.AGI.
11. 能校正+1移码突变基因的是
A.突变型氨酰tRNA合成酶; B.含突变型反密码子的tRNA;
C.含四个碱基的反密码子的tRNA; D.能切割一个核苷酸的酶.
12. 用[a—32P]dATP标记一个DNA片段,需要用
A.多核苷酸激酶; B.DNA连接酶; C.DNA聚合酶; D.逆转录酶.
13. DNA甲基化是基因表达调控的重要方式之一,甲基化位点是
A.CpG岛上的C的3位; B.CpG岛上的G的3位; C.CpG岛上的C的5位; D.CpG岛上的G的7位.
14. 遗传学的三大定律是
A.连锁定律.分离定律.独立分配定律; B.隐性定律.自由组合定律.独立分配定律;
C.重排定律.突变定律.减数分裂定律; D.质量性状定律.数量性状定律.混合性状定律.
15. 非孟得尔式遗传可以由以下的原因引起
A.核外基因的存在; B.转座子的激活; C.逆转录病毒的插入; D.同源重组.
16. 人类某些神经系统 疾病主要与下列那种核苷酸序列的不正常扩增有关
A.三核苷酸序列; B.具有回文结构的六核苷酸序列; C.CpG序列; D.SINE序列.
17. 基因参与凋亡的许多证据最初来源于对线虫(C.elegens)发育的研 究,这些参与凋亡调控的基因称为Ced基因,其中和人类基因Bcl 2同源的是 A.Ced 3; B.Ced 5; C.Ced 7; D.Ced 9.
18. 根据F2代出现极端表型的频率可以估算数量性状基因的数目,如果 这一频率为0.0143,则该性状由
A.2对基因控制; B.3对基因控制; C.4对基因控制; D.5对基因控制;
19. Lineweaver-Burk双倒数作图法和求抑制剂Ki的Dixon作图法分别采 用
A.1/v对于1/[S]作图和1/v对1/[I]作图; B.1/v对于1/[S]作图和1/v对[I]作图;
C.1/v对于[S]作图和1/v对1/[I]作图; D.1/v对于1/[S]作图和v对1/[I]作图.
20. 在含金属酶中,最常见的金属是
A.铜; B.铁; C.锌; D.镁.
21. 英国科学家完成牛胰岛素的氨基酸序列测定工作和中国科学家完成 牛胰岛素的人工合成工作分别在
A.20世纪40年代和20世纪50年代; B.20世纪50年代和20世纪60年代
C.20世纪50年代和20世纪50年代; D.20世纪60年代和20世纪70年代
22. 催化糖原合成的三种酶是
A.糖原磷酸化酶,糖原合酶,糖原分支酶;
B.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原磷酸化酶,糖原分支酶;
C.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原磷酸化酶,糖原合酶;
D.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原合酶,糖原分支酶 .
23. 蛋白质在处于等电点时的溶解度
A.最小; B.最大; C.与等电点没有关系.
24. 酵母双杂交系统被用来研究
A.哺乳动物功能基因的表型分析; B.酵母细胞的功能基因; C.蛋白质的相互作用; D.基因的表达调控.
25. 凝集素是一类蛋白质,它们能专一地识别
A.某个氨基酸残基或特定肽段序列; B.某个糖基或特定寡糖链;
C.某个核糖核苷酸或特定寡核糖核苷酸序列; D.某个脱氧核糖核苷酸或特定寡脱氧核糖核苷酸序列.
26. 2003年诺贝尔化学奖授予研究生物膜上通道蛋白的科学家,他们阐明了
A.Cl-通道与Na+通道; B.K+通道与H2O通道; C.Ca2+通道与H+通道; D.乙酰胆碱通道与GABA通道.
27. 蔗糖与麦芽糖的区别在于
A.麦芽糖是单糖; B.蔗糖是单糖; C.蔗糖含果糖; D.麦芽糖含果糖.
28. 下述化合物中不属于胆固醇衍生物的是
A.雌性激素; B.胆酸; C.黄体酮; D.前列腺素.
29. 抗霉素A是一种抑制剂,它抑制
A.线粒体呼吸链复合物I; B.线粒体呼吸链复合物II; C.线粒体呼吸链复合物III; D.线粒体ATP合成酶.
30. 细胞色素C是重要的呼吸链组份,它位于
A.线粒体内膜的内侧; B.线粒体内膜的外侧; C.线粒体外膜; D.细胞质内.
三.简答题:每题5分,共25分.答案一律写在答题纸上.
1. 当细胞中某一个蛋白激酶被活化,结果却发现细胞中有一个蛋白质的磷酸化水平没有提高,反而降低了.请问这个结果可不可信?如何解释?
2. 根据结构与催化机制(而不是根据被驱动的离子类型),说出三类驱动离子的ATP酶的名称.
3. 简述磷脂酶C催化磷酯酰肌醇4,5-二磷酸的水解产物可引发的信号传递事件.
4. 有一寡聚核糖核苷酸片段:ApCpCpCpCpApGpGpGpUpUpUpApGp,请分别写出用牛胰核糖核酸酶A,核糖核酸酶T1和 碱处理得到的完全降解物.
5. 简述平衡致死系统作为一种隐性纯合致死突变品系保存方式的原理
四.问答题:每题10分,共50分.
1. 已知细胞质膜中脂分子组成的复杂性远远超过它们作为单纯的生物或物理屏障所需的程度,你认为这有什么生物学意义?
2. 一个可逆抑制剂对酶的抑制常数(Ki)是否就等于当酶的活性被抑制到50%时的抑制剂浓度?请你通过对一个竞争性抑制剂和一个非竞争性抑制剂的酶动力学分析,对上述问题做出解答.
3. 目前已得到原子分辨率结构的蛋白质膜蛋白的比例不到1%,请问解析膜蛋白空间结构的难度在那里?测定膜蛋白原子分辨率空间结构的方法有那些?
4. 简述表观遗传变异(epigenetic variation)的概念与意义,并举出两种主要表现形式.
5. 严重急性呼吸综合症(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS)的病原体被称为SARS病毒.就你所知,简单 回答SARS病毒的类属,结构特征和生物特性.
中国科学院2004年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、-。2、- 鞘糖脂是细胞膜重要组成成分之一，调节细胞的生长、分化，控制肿瘤的侵润与转移。3、+。4、-。5、- c值悖论和N值悖论。6、+。7、+ 真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构和3’端的Ploy尾巴。8、-。9、- 叶绿体和线粒体中的可能会不 同。10、+。11、+。12、-。13、-。14、-。15、- 半纤维素不是。16、+。17、-。18、-。19、+。20、+。
二、选择题
1、C 类二十烷是由二十碳多不饱和脂肪酸包括二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十碳三烯酸衍生产生的物质，主要有前列腺素、前列环素、凝血嗯烷、白三烯、Lipoxins及花生四烯酸在细胞色素P450催化下生成的代谢物质等。2、A单加氧酶催化什么反应也要知道。3、B。4、B。5、B 一氧化氮能激活乌本苷环化酶，使GTP转化为环鸟苷酸发挥其第二信使作用。6、C。7、B。8、D 氨基酸活化由氨酰tRNA合成酶完成，在可溶性胞质内完成。9、D。10、C。11、C。12、C 如果是γ32p-dATP就要用核酸激酶。13、C。14、A。15、A。16、A 三核苷酸序列重复数过长时容易造成DNA序列的二级结构产生，因而造成小部分的茎环结构，若此时三核苷酸重复序列的区域发生了滑动现象，CAG因重复序列的关系仍可使双股配对，一旦该区产生了缺口加上茎环结构的还原拉直，若再有DNA聚合酶修补缺口后则会造成三核苷酸序列的不正常延长。一旦这种情形经常发生的话，便会形成异常扩张的结果，而目前所知与三核苷酸重复序列异常扩张相关的疾病约有数十种其中包括亨廷顿氏症等。17、D。18、B。19、B。20、C 金属酶是一种含有一个或多个金属离子作辅助因子的酶。金属活酶中，金属离子松散的结合，但却是酶活性的激活剂，种类很多。21、B。22、D。23、A。24、C 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因。25、B 凝集素最大的特点在于它能识别糖蛋白和糖肽中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞膜表面的碳脂化合物决定簇。26、B。27、C。28、D。29、C。30、B 细胞色素c位于线粒体内膜的外侧。
三、简答题
1、⑴结果是可以信的⑵可能的情况：a 被活化的蛋白激酶并不直接作用于上述蛋白质 b 被疾化的蛋白激酶能活化上述蛋白的磷酸化酶或者抑制上述蛋白的激酶。
2、V型 P型 F型
3、参照课本 （信号传递一直是重点，要滚瓜烂熟）
4、ApGpGpGpUp+ApCp+ApGp+3Cp+2Up牛胰核酸酶A专一性切割嘧啶核苷酸的3'-磷酸酯键 核糖核酸酶T1鸟苷酸的磷酸酯键 碱处理的降解所有核苷酸的2'和3'磷酸酯键
5、紧密连锁或中间具有到位片段的相邻基因由于生殖细胞的同源染色体不能交换,所以可以非等位基因的双杂合子,保存非等位基因的纯合隐性致死基因,该品系被称为平衡致死系.
四、问答题
1、答题要点：指出它们作信号传递分子或者信号传递分子的生成、储存与转化的物质形式的作用
2、⑴动力学方程
无抑制剂时 V=Vmax[S]/{Km+[s]}
竞争性抑制剂存在时 V=Vmax[S]/{Km(1+[I]/K1)+[S]}
非竞争性抑制剂存在时 V=Vmax[S]/{(Km+[S])(1+[I]/K1)}
⑵对于非竞争性抑制剂而言对酶的抑制常数(K1)是否就等于当酶的活性被抑制到50%时的抑制剂浓度，而对于竞争性抑制剂上述说法不成立。
3、难度：膜蛋白的表达、分离和纯化都比水溶性的要难，很难获得单晶。方法：X-射线衍射，电子衍射三维重组。
4、表观遗传现象是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列的变化，观遗传变异包括基因沉默、DNA甲基化、核仁显性、基因组印记等方面.
5、SARS病毒属冠状病毒科冠状病毒属[答出是一种冠状病毒也可给2分]带包膜的正链RNA球形病毒[答出是一种正链RNA病毒也可给2分]大小为70到130nm，基因组约为29Kb。含有多种独立的基因，转录合成一系列病毒结构蛋白和非结构蛋白，结构蛋白有：核衣壳蛋白（N蛋白）、跨膜糖蛋白（M蛋白）、刺突糖蛋白（S蛋白）等。非结构蛋白有聚合蛋白等，复制不经DNA中间体，周期是(+)RAN->(-)RNA->(+)RNA
中科院2005生化与分子
一、 判断题 20题，20题，每题1.5分，共30分.
1、鞘磷脂的代谢过程主要与细胞质膜的流动有关与细胞生物活性分子的生成调节无关。
2、蛋白质的修饰与其运输和定位有关，而与其降解代谢无关。
3、蛋白质的豆蔻酰化是蛋白质脂肪酸化的一种形式。
4、可逆性膜锚定与蛋白激酶参与的信号转到有关，而与G蛋白（如Ras）参与的信号转导无关。
5、蛋白质溶液出现沉淀与蛋白质变性存在必然的关系。
6、Km值是酶的特性常数之一，与酶的浓度、pH、离子强度等条件或因素无关。
7、一个酶的非竞争性抑制剂不可能与底物结合在同一部位。
8、蛋白质泛素化（ubiquitination）过程需要三种蛋白质（酶）的参与，其中之一是泛素--蛋白连接酶。
9、往线粒体悬液中加入NADH可以还原线粒体的辅酶Q。
10、膜上有些七次跨膜受体在与配基结合时会形成二体。
11、低浓度不含钾离子的等渗缓冲液中悬浮着内含0.154M氯化钾的脂质体，此时往悬浮液中加入缬氨霉素，悬浮液的pH会下降。
12、内质网系膜结合的钙ATP酶在催化ATP水解时促进Ca2+/2H+交换。
13、辅酶I（NAD+ ）、辅酶II（NADP+）、辅酶A（CoA）、黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）中都含有腺嘌呤（AMP）残基。
14、端粒酶（telomerase）是一种RNA蛋白质复合物，其作用机制是以RNA为模板，由蛋白质催化逆转录; 所以广义上说，端粒酶是种逆转录酶。
15、Tm是DNA的一个重要特性，其定义为：使DNA双螺旋90％解开时所需的温度。
16、与DNA双螺旋相反方向缠绕而形成的超螺旋叫做“负超螺旋”。
17、细菌中的插入序列（IS）具有转座能力，能随机插入到任一DNA序列中，在靶点两侧形成一段短的正向重复序列。
18、细菌代谢酶的诱导和合成途径中酶的阻遏，调节蛋白都对操纵子起负调控作用。
19、真核RNA聚合酶II最大亚基C末端重复序列上的乙酰化导致RNA聚合酶II与其它转录的起始与延伸。
20、卫星DNA是一类高度重复序列，通常由串联重复序列组成。
二、选择题：30题，30题，每题1.5分，共45分.
1、磷脂分子的代谢可直接产生
A.肌酸；B.氨基酸；C.甾体激素；D.信号传导分子
2、鞘磷脂分子的代谢不产生
A．磷脂酰肌醇；B，神经酰胺；C，鞘胺醇；D，乙酰胆碱。
3.直接受cAMP调节的分子是
A蛋白激酶C；B，蛋白激酶A； C，蛋白激酶G；D蛋白激酶B
4体内一氧化氮合成前体是
A，脂类分子；B，核苷酸；C，精氨酸；D，尿素
5一氧化氮的受体是一种
A，G蛋白偶联受体； B，腺苷酸氧化酶；C，鸟苷酸环化酶；D,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶
6，对于一个正协同效应别构酶当有激活剂（正调节物）存在下，其协同性
A，减小；B，增加；C，不变
7，亲核催化中酶蛋白上最常见的提供亲核基团的残基是
A，His，Ser，Cys； B，His，Lys，Arg； C，Asp，Glu，Phe； D，Asn，Gln，Trp
8，“自杀性底物”指的是
A，一种可逆抑制剂；B，一种亲核标记试剂；C，一种不可逆抑制剂。
9，表面生长因子（EGF）受体和转化生长因子β（TGFβ）受体
A，皆为蛋白酪氨酸激酶；
B，皆为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶；
C，分别为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶和蛋白酪氨酸激酶；
D，分别为蛋白酪氨酸激酶和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。
10，磷酸果糖激酶是葡萄糖酵过程中最关键的调节酶，ATP与该酶的关系
A，既是底物又是别构激活剂 ； B，既是底物又是别构抑制剂；
C，只是底物；D，只是别构抑制剂。
11，底物分子上引进一个集团以后，导致酶与该底物结合能增加，此时酶反应速度增大，原因是
A，增加的结合能被用来降低Km； B，增加的结合能被用来增加Km；
C，增加的结合能被用来降低反应活化能； D，增加的结合能被用来增加反应活化能。
12，在接近中性pH条件下，即可为氢离子受体，也可为氢离子供体的基团是
A． His-咪唑基 ； B，Cys-巯基；C，Lys-ε-氨基； D，Arg-胍基
13，细胞质内蛋白质浓度为（W/V)为
A，0.1%左右；B，0.5%左右 C，2.5%左右 D，＞10%
14，细胞色素C的pI
A,<6; B,6-7 C，7-8 D，＞8
15,一氧化碳抑制呼吸链的位点在
A，琥珀酸脱氢酶； B，NADH脱氢酶； C，还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶；D，细胞色素c氧化酶
16，正常细胞质膜上磷脂酰丝氨酸的分布
A，在脂双层的内外二层大致相当； B，主要在脂双层的内层； C，主要在脂双层的外层；
17，分泌红细胞生成素（EPO）的组织或器官是
A，肝；B，肾；C，骨髓；D，脾。
18，甘油醛-3-磷酸脱氢酶与
A，糖酵解；B，甘油磷脂中的甘油合成；C，尿素循环；D，脂肪酸氧化
19，用双脱氧末端终止法（即SangerDNA测序法）测定DNA序列，要除去DNA聚合酶中的
A，核酸内切酶活性； B，5’到3’外切酶活性； C，3'到5'外切酶活性
20，DNA甲基化作用位点通常是CpG岛（CpG island）上的
A，C的3位（生成m3CpG）; B,C 的5位（生成m5CpG）
C，G的3位 （生成Cpm3G）； D，G的7位（生成Cpm7G）。
21，含有胸腺嘧啶的RNA种类是
A,rRNA; B,mRNA; C,tRNA; D,snRNA
22,大肠杆菌中负责DNA复制的酶是
A，DNA聚合酶I（Kornborg酶）； B，DNA聚合酶II C，DNA聚合酶III D，DNA聚合酶IV
23，B型右旋DNA的螺旋距比Z型左旋DNA
A，大； B，小； C，相同；
24，催化核糖-5-磷酸和ATP合成5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）的酶是
A，磷酸核糖激酶；B，磷酸核糖酶；C，磷酸核糖焦磷酸激酶；D，ATP激酶
25，乳糖操纵子的阻遏蛋白与DNA结合的结构域有
A，锌指（zinc finger）结构； B，亮氨酸拉链（leucine zipper）结构；
C，螺旋-环-螺旋（helix-loop-helix）结构； D，螺旋-转角-螺旋（helix-turn-helix）结构
26，逆转录病毒（retrovirus）的逆转录酶在宿主细胞中合成负链DNA所用的引物是
A，tRNA B，mRNA C，rRNA D，5SrRNA
27，真核RNA聚合酶III的功能是
A，转录tRNA和5SrRNA等小rRNA基因； B，转录蛋白质基因和部分snRNA基因
C，只转录rRNA基因；D转录多种基因
28，在DNA重组过程中，RecA蛋白能促进交换的DNA是
A，同源双链DNA；B同源单链与双链子DNA；C同源单链DNA；D同源单链DNA与双链DNA
29，生长激素（GH）属于
A，固醇类激素; B,脂肪酸衍生物激素； C，含氮类激素； D，糖类激素；
30，青霉素的抗菌作用主要是通过
A，抑制细胞膜合成；B，抑制细胞壁合成；C，破坏其内酰胺环；D，干扰DNA合成；
三、简答题；5题，每题5分，共25分。
1，简述SH2与SH3结构域的功能。
2，某一酶催化单底物反应，S1 和S2都是该底物，已知它们的Kcat（或Vmax）和Km 值，在S1和S2同时存在并且浓度相同的情况下，请给出该酶催化S1和S2 反应速度之比的表达式。
3，依序写出三羧酸循环中的酶。
4，解释下列非编码RNA（non-coding RNA）名词：（1）核仁小RNA（small nucleolar RNA,snoRNA);(2)干扰小RNA（small interfering RNA,siRNA);(3)微RNA（microRNA，miRNA）。
5，生物体存在大量的mRNA前体的‘选择性剪接（alternative splicing)' 过程。什么是选择性剪接？有几种方式？
四、问答题：5题，每题10分，共50分。
1、阐述磷脂酶A2 催化的反应与信号转导的关系。
2、在纯化某一个蛋白质的过程中，有一个分子量比目标蛋白质小的蛋白质与目标蛋白质一同被提纯。请举出两种办法证明或排出这两个分子量小的蛋白质是目标蛋白质的部分产物。
3、试论述非离子型去垢剂增溶膜蛋白的机制。
4、阐诉逆转录转座子与逆转录病毒的异同点。
5、阐述酵母转录激活因子GAL4 的调控方式及其在酵母双杂合系统（yeast two hybrid system）中的应用
中国科学院2005年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、- 如血小板活化因子在凝血过程中的作用。2、- 泛素化就可了引起蛋白质的降解。3、+ 蛋白质的脂肪酸化修饰常见的有：异戊二烯化 和两种酰化，豆蔻酰化是两种酰化形式之一，能增加特定G蛋白的α亚基对膜结合的β、γ亚基的亲和力。4、+。5、- 结晶也出现沉沉，但是和变性无关。 6、- Km是特征常数，其大小只与酶的性质有关而与酶的浓度无关，但是随着pH、离子浓度等条件有关。7、+ 酶的可逆性抑制剂的定义就是与酶的活性部位之外的位点结合且与底物没有共同之处的抵制剂。8、+ 其余两种酶是泛素激活酶和泛素携带蛋白。9、- NADH不能穿过线粒体内膜。10、-。 11、+ 缬氨霉素介导K+的单向运输，脂质体内K+浓度降低后，平衡向解离放出H+的方向移动，所以pH会下降。12、- 吸收钙，但不是促进交换。13、- FMN不含。14、+。15、- 使DNA双螺旋50％解开时所需的温度。 16、-。17、- 通常有一定的选择性。18、- 也有正调控。19、- 磷酸化。20、+。
二、选择题
1、D。2、A 磷脂酰肌醇是甘油磷脂。3、B。cAMP特异的活化cAMP依赖的蛋白激酶而表现出不同的效应。蛋白激酶A有两个催化亚基和两个调节亚基组成，在没有cAMP时，以钝化复合体形式存在。cAMP与调节亚基结合改变调节亚基构象，使调节亚基和催化亚基解离释放出催化亚基。4、C。NO合成前体物质是L-精氨酸。5、C。6、B。7、A Ser的羟基 His的咪唑基 Cys的巯基。8、C 自杀性底物是Kcat型抵制剂。9、D。10、B 该酶受到高浓度ATP的抑制。11、C。12、A。13、D 在细胞质基质中蛋白质含量约为20%-30%，形成一种粘稠的胶体。14、D 细胞色素c的pI是10.25。15、D。16、B 磷脂酰丝氨酸磷脂酰乙醇胺公布在外膜，鞘磷脂的卵磷脂公布在内膜。17、B。18、A D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶是生物体内葡萄糖交接过程中的一个关键酶，在有NAD+和无机磷酸存在的条件下，它能催化D-甘油醛-3+磷酸氧化磷酸化成1，3-二磷酸甘油酸。GAPDH含有4个化学上等同的亚基，每个亚基包括333个残基，GAPDH四体的分子量约为145ku。19、B。20、B。21、C。22、C DNA聚合酶Ⅲ是细胞内DNA复制所必需的酶，缺乏该酶的温度突变株在限制温度内是不能生长的，次突变株的裂解液也不能合成DNA，但加入DNA聚合酶Ⅲ则可以恢复其合成DNA的能力。23、B。24、C 体内PRPP由5-磷酸核糖与ATP作用产生，由磷酸核糖焦磷酸酶激酶催化。25、D。26、A。27、A 真核生物的RNA聚合酶分三类。28、D。29、C。30、B 与细菌细胞膜上的青霉素结合蛋白结合而妨碍细菌细胞壁粘肽的合成，使之不能交联而造成细胞壁的缺损，致使细菌细胞破裂而亡。
三、简答题
1、SH2结构域能选择结合不同位点的磷酸化酪氨酸残基，SH3能选择结合富含Pro的序列。这两种结构域能作为接头蛋白上的结构域行使信息传递的功能，但其本身没有催化活性。
2、[ES1]/[ES2]=Km2/Km1 ⑴ V1/V2=Kcat1×[ES1]/Kcat2×[ES2] ⑵ 把⑴代入⑵就能得结果
3、柠檬酸酶合酶 乌头酸酶、异核酸酶脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系、琥珀酰CoA合成酶、琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶
4、⑴参加rRNA前体的甲基化、假尿苷化和切割的一类小RNA。⑵dsRNA经过核内分解产生长度为21-23个核苷酸即小干扰RNA.siRNA可直接诱导基因沉默。⑶是一类大的非编码小RNA。长度约为42个核苷酸，它们被认为以其它基因为目标，并调节它们的表达。
5、选择性剪切是一个基因转录产物在不同的发育阶段、分化细胞和生理状态下，通过不同的剪切方式可以得到不同的mRNA和翻译产物。方式有1、剪接产物缺失一个或几个外显子2、剪接产物保留一个或几个内含子3、外显子中存在3'或5'剪接点，从而部分缺失该外显子4、内含子中存在3'或5'剪接点，从而保留部分内含子。
四、问答题
1、主要就是磷脂酶A2能切割磷脂形成花生四烯酸，花生四烯酸是一系列生物活性物质的前体，具体内容课本上很容易找到，具体在哪一页我回学校后翻翻课本再告诉大家。
2、⑴制备两种蛋白的抗体，进行交叉免疫印迹。⑵进行全测序，比较序列一致性。⑶进行酶切图谱分析。
3、非离子型去垢剂为两亲性分子，在油水混合物中可形成微团，当浓度高于临界微团浓度的时候，形成以去垢剂为主并掺有膜脂和膜蛋白的混合微团，也就增溶了膜蛋白。
4、相同点：以RNA中介反转录为DNA，可以将NDA宿主细胞的基因组上，有长末端重复序列。
不同点：逆转录转座子在插入位点上形成短的正向重复序列，不发独立感染的方式传播，其中的非病毒超家族不能编码转座酶，逆转录病毒的转录以tRNA为引物，DNA整合到宿主染色体上的位点是随机的。
5、GAL4由两个结构域组成，一个是DNA结合结构域，一个是转录激活结构域。
可为将编码侍测蛋白 X的DNA序列同编码GAL4结合结构域的DNA序列克隆在一个载体上，表达产生X-GAL4杂合蛋白，将编码蛋白质Y的DNA序列同编码转录激活结构域的DNA序列克隆在一个载体上，表达产生Y-GAL4杂合蛋白。这两种杂合蛋白都有核定位序列，当用这两种载体同时转化酵母细胞后，表达产生的两种蛋白都定位在核内。如果x蛋白和y蛋白有相互作用，则各自所带和蛋白就会重新组合成为一个完整的转录因子，该因子同酵母的GAL1基因上游的激活序列结合，使报告基因表达。
中科院2006生化与分子
一、是非题：20题，共30分
1、蛋白质变性的实质是非共价键断裂，天然构象解体，但共价键未发生断裂。
2、有些抗生素是多肽或其衍生物。
3、“自杀性底物”是指在亲和标记中使用共价修饰剂。
4、糖原磷酸化酶只催化1-4糖苷键的磷酸解。
5、到目前为止发现的信号转导蛋白G蛋白都是三种亚基构成的。
6、红外光谱可以研究蛋白质溶液的构象。
7、丙氨酸具有光学活性。
8、线粒体内膜固有蛋白大多是线粒体编码的。
9、转录因子ⅢA能与5SRNA以及5SRNA基因调控区结合因而5SRNA能对自身的合成进行负反馈调节。
10、酶催化的反应速度总是随着底物浓度的升高而加快。
11、线粒体呼吸链复合物Ⅱ的三维结构已被我国科学家解析。这个复合物催化琥珀酸脱氢辅酶Q还原酶的同时产生跨膜质子移位。
12、去垢剂是一类既有亲水部分又有疏水部分的分子。
13、质量性状是由单个基因支配，而数量性状是由多个基因决定的。
14、生物体的遗传性状完全是由基因序列决定的。
15、脑细胞有CD4表面受体，所以HIV病毒也能感染脑细胞。
16、线粒体基因采用的密码子与细胞的密码子有不同。
17、原核生物的mRNA翻译起始区有一个SD序列，它与23SRNA的3’端结合而起始翻译。
18、葡萄糖-6-磷酸酯酶是高尔基体的标志酶。
19、孟德尔遗传定律和摩尔根遗传定律分别反应了位于不同染色体和相同染色体上的基因的遗传规律。
20、限制性内切酶是识别同时切割某特定DNA序列的酶。
二、选择题：30题，共45分。
1、肌原纤维中的粗丝和细丝
A．分别由肌动蛋白和肌球蛋白组成 B．分别由肌球蛋白和肌动蛋白组成
C．皆由肌动蛋白组成 D．皆由肌球蛋白组成
2、参与蛋白质组成的氨基酸是L-型的，其多肽链折叠成的螺旋结构
A．大多数是右手螺旋 B．大多数是左手螺旋 C．右手和左手螺旋各占50% D．随机构成
3、DNA切口平移所用的酶为
A．Klenow酶 B．Taq酶 C．DNA聚合酶 D．DNA链激酶
4、一个分子的人血红蛋白分子中含有的Fe离子的数目为
A．一个 B．二个 C．三个 D．四个
5、如果花的红色和黄色是由一对等位基因决定，杂交子一代最不可能出现 的花
A．红色 B．黄色 C．橙色 D．白色
6、胶原蛋白由若干胶原分子组成，主要形成 结构
A．α-螺旋 B．β-螺旋 C．β-折叠和三股螺旋 D．三股螺旋
7、柠檬酸循环的化学反应式是
A．乙酰-CoA+3NAD++FAD+H2O→CoASH+3NADH+2H++FADH2+2CO2
B．乙酰-CoA+3NADH+FAD+H2O→CoASH+3NAD++2H++FADH2+2CO2
C．乙酰-CoA+3NAD++FAD+Pi+GDP+2H2O→CoASH+3NADH+2H++FADH2+GTP+2CO2
D．乙酰-CoA+3NADH+FAD+Pi+GDP+2H2O→CoASH+3NAD++2H++FADH2+GTP+2CO2
8、蛋白质芯片技术基本上是基于 方法中的原理
A．Northern blot B．Western blot C．Southern blot D．Eastern blot
9、引起双倒数作图斜率与纵轴截距都改变的可逆抑制剂可以被判断为
A．竞争性抑制剂 B．非竞争性抑制剂 C．混合性抑制剂 D．非竞争性或混合性抑制剂
10、酶促合成Ⅱe-tRNA的反应经过Ⅱe –AMP中间体：Ⅱe +ATP→Ⅱe –AMP+PPi，Ⅱe –AMP+tRNA→Ⅱe –tRNA+AMP。若以此反应从32P标记的PPi合成32P标记的ATP，除了aa-tRNA合成酶外还需要
A．ATP、32PPi B．tRNA、ATP、32PPi C．Ⅱe 、ATP、32PPi D．Ⅱe 、AMP、32PPi
11、两株高矮不同的亲本进行杂交，子一代的株高比高的亲本还要高，决定株高的基因是
A．显性基因 B．隐性基因 C．共显性基因 D．数量性状基因12、用于氨基酸分析的双向纸层析属于
A．交换层析 B．亲和层析 C．分配层析 D．薄层层析
13、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳用来测定蛋白质（酶）的表观分子量的依据是
A．电泳迁移率与蛋白质的电荷性质（等电点）相关
B．电泳迁移率与蛋白质的分子构象相关
C．电泳迁移率与蛋白质分子量的对数值线性相关
D．电泳迁移率与蛋白质分子量相关
14、酶的纯化过程中最需要关注的指标是
A．总蛋白量变化和总活力变化 B．蛋白质浓度变化和比活力变化
C．比活力变化和总活力变化 D．总活力变化和蛋白质浓度变化
15、钠钾ATP酶催化钠离子与钾离子跨膜传送，每水解一分子ATP有
A．2个Na+由细胞内到细胞外，2个K+由细胞外道细胞内
B．2个K+由细胞内到细胞外，2个Na+由细胞外道细胞内
C．3个Na+由细胞内到细胞外，2个K+由细胞外道细胞内
D．3个K+由细胞内到细胞外，2个Na+由细胞外道细胞内
16、苍术苷是一种抑制剂，它抑制
A．钠钾ATP酶 B．线粒体ATP合成酶 C．Ca2+ATP酶 D．线粒体ADP-ATP传送载体
17、在遗传病基因的定位克隆中，一般利用疾病基因和标记基因之间的 关系来定位目标基因
A．自由组合 B．相互分离 C．相互连锁 D．显隐性
18、Dixon作图法求可逆抑制剂的抑制常数是针对
A．竞争性抑制剂 B．非竞争性抑制剂 C．反竞争性抑制剂 D．混合型抑制剂
19、硫胺素焦磷酸的主要作用是
A．促进乙酰辅酶A生成 B．作为脱羧酶的辅酶 C．是辅酶Q的前体 D．促进脂肪酸的β氧化
20、细菌ABC转运蛋白的功能包括
A．促进药物扩散传送进入细菌 B．利用ATP的能量将药物传送到细菌外
C．将分泌蛋白传送到细胞外 D．促进脂多糖的分泌
21、磷酸果糖激酶是糖酵解途径中的关键调节酶，对其调节的正确描述是
A．果糖2，6-二磷酸与果糖1，6-二磷酸都是其催化反应的产物
B．果糖2，6-二磷酸是其一个调节剂，有效激活其活性
C．ATP是其底物，不会对其产生抑制作用
D．柠檬酸是其一个有效的激活剂
22、青霉素的作用是抑制
A．二磷脂酰甘油的合成 B．膜上磷脂交换蛋白 C．聚糖肽转肽酶 D．D-氨基酸氧化酶
23、 不是证明核酸是遗传物质的研究
A．孟德尔的豌豆实验 B．艾弗里的肺炎球菌试验
C．贺希和切斯的噬菌体试验 D．康拉德的烟草花叶病毒试验
24、由核DNA编码的膜蛋白是在 上合成的
A．核膜B．高尔基体C．内质网系D．膜蛋白质合成小泡
25、λ噬菌体缺失突变体的DNA长度从17μm变成15μm，此突变体缺失了 碱基对
A．6.67×103 B．5.88×103 C．5.55×103 D．5.26×103
26、端粒酶是一个核蛋白复合体。它能够 为模板合成DNA
A．不用DNA或RNAB．用核蛋白复合体中的DNAC．用核蛋白复合体中的RNAD．用核糖体中的DNA
27、反基因寡核苷酸（三螺旋形成寡核苷酸）抑制蛋白质表达是由于
A．抑制靶基因的转录B．抑制靶mRNA前体的加工C．抑制靶mRNA的翻译D．促进靶mRNA的降解
28、用放射性同位素只标记细菌DNA而不标记RNA，需在培养基中加
A．[α-32P]dATP B．[γ-32P]ATP C．[3H]TdR D．32Pi
29、CDP-胆碱是 反应的活化分子
A从神经酰胺合成鞘磷脂B从葡萄糖合成糖原C从丝氨酸合成磷脂酰丝氨酸D从神经酰胺合成脑苷脂
30、纯显性基因玉米穗长20cm，纯隐性基因玉米穗长4cm，每个基因的表现值为4cm，则纯显性基因数有 个
A．3 B．4 C．5 D．6
三、简答题：5题，共25分。
1、一个多肽的一级结构为Leu-Pro-Ser-Trp-Ala。试描述该多肽在20℃，0.01M Tris-HCl，PH7.0缓冲液中测得的紫外吸收光谱和荧光发射谱。
2、请概述胰岛素如何调节糖原代谢以及胰岛素缺乏与糖尿病的内在关系。
3、请举出两种测定线粒体内膜细胞色素氧化酶的方法与原理。
4、有15N同位素标记的DNA研究复制机制。如果DNA复试是全保守的，则在普遍的培养集中生长一代和二代后，15N在预期的子代DNA中的分布是如何的？
5、从生物A中得到了一个基因的DNA序列和其编码的蛋白质的氨基酸序列；从生物B中得到了一个不同基因的DNA序列和其编码的蛋白质序列。试从DNA序列和蛋白质序列的结构特点以及DNA和蛋白质的关系，说明生物是进化来的，而不是不同起源的。
四、问答题：5题，共50分。
1、蛋白质中疏水作用力主要由何驱动？输水作用力与温度有何相关性，并解释之。
2、某酶分别催化两种不同的底物发生同样的反应。如果该酶对底物A的Km与Vmax值为0.1mM和100U/mg（1U的酶为每秒钟转换1μm底物的酶量），对底物B的Km与Kcat值为5μm和50min-1，该酶的分子量为50kDa。假设两种底物同时存在且浓度相同，该酶催化两种底物的速度之比如何？
3、试述胆固醇在人体中的三种生物学功能，列出胆固醇从乙酰辅酶A合成过程中的五个中间物，并说明LDL在胆固醇代谢中的作用。
4、Thomas Cech 发现了四膜虫核糖体RNA（rRNA）的前体能够自我剪切为成熟分子而不需要结合任何四膜虫的蛋白质。如果你是Thomas Cech ，如何设计实验证明这一发现。
5、你克隆到一个蛋白质，序列如下：
1 MESADFYEVE PRPPMSSHLQ SPPHAPSNAR LWLWSPGRGPR AAPSPTCRPG
AAGRICEHET
61 SIDISAYIDP AAFNDEFLAD LFQHSRQQEK AKAAAGPAGG GGDFDYPGAP
AGPGGAVMSA 121 GAHGPPPGYG CAAAGYLDGR LEPLYERVGA PALRPLVIKQ
EPREEDEAKQ LALAGLFPYQ 181 PPPPPPPPHP HASPAHLAAP HLQFQIAHCG
PTPPPTPVPS PHAAPALGAA GLPGPGSALK 240 GLAGAHPDLR TGGGGGGGSGA
GAGKAKKSVD PDKAKQRNVE LTQQKVELTS DNDRLRKRVE 301 QLSREADTLR
GIFRQLPESS VKLAMATARL ARGGGTLAGR PPGLWRPRGW FRVAGSGCPG 361
RASQD
根据已知的研究结构表明它是一个转录因子。从序列计算得到的分子量为40kDa，但从蛋白质超离心沉降方法得到的分子量是80kDa，你认为最可能的原因是什么？请根据你得出的假说设计实验，并预测如果假说正确时的实验结构。根据氨基酸的序列，你认为什么特点使得这个蛋白质发生了你所提出的假说中的现象，并设计实验加以验证。
中国科学院2006年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、选择题
1、+ 首先来看蛋白质变性的概念：在理化因素作用下，蛋白质分子内的二硫键和非共价键被破坏，天然构象发生变化，引起蛋白质理化性质和活性的改变。蛋白质变性的实质：蛋白质分子中的二硫键和次级键被破坏，变性不涉及共价键的断裂。2、+ 如杆菌肽。3、- Kcat型专一性不可逆抑制剂这种抑制剂是根据酶的催化过程来设计的，它们与底物类似，既能与酶结合也能被催化发生反应，在其分子中具有潜伏反应基因，该基团会被酶催化而活化，并立即与酶活性中心某基团进行不可逆结合，使酶受抑制。此种抑制专一性强，又是经酶催化后引起，被称为自杀性底物。4、+。5、- 反例：Ras就是信号转到中的一种G蛋白，Ras蛋白是由一条多肽链组成的单体蛋白。6、+ 用红外光谱研究血清白蛋白在水溶液中的二级结构构象的变化。7、+ 丙氨酸属于手性化合物，具有光化学活性。8、-。9、+。10、- 在酶浓度不变时，不同的底物浓度与反应速度的关系为一矩形双曲线，即当底物浓度较低时，反应速度的增加与底物浓度增加成正比；此后，随底物浓度的增加，反应速度的增加量逐渐减少；最后，当底物浓度增加到一定量时，反应速度达到最大值，不再随底物浓度的增加而增加。11、-。12、+ 去垢剂是一端沁水一端疏水的两性小分子，是分离与研究膜蛋白的常用试剂。13、+。14、-。15、+ 单核巨噬细胞：因其表面具有CD4受体，所以也易被HIV侵犯，研究发现HIV感染的单核巨噬细胞有播散HIV感染的作用，它可以携带HIV进入中枢神经系统。在脑细胞中受HIV感染的主要是单核巨噬细胞，如小胶质细胞。16、+。17、- 与核糖体小亚基16sRNA结合。18、- 葡萄糖-6-磷酸酶是内质网的标志酶。19、+。20、+。
二、选择题
1、B 肌原纤维由粗肌丝和细肌丝组装而成，粗肌丝的成分是肌球蛋白，细肌丝的主要成分是肌动蛋白，辅以原肌球蛋白和肌钙蛋白。2、A 参与蛋白质组成的是L-型氨基酸绝大多数形成稳定的右手螺旋，个别是左手螺旋。3、C。4、D。5、D。6、D。7、C。8、B。9、D。10、D。11、D。12、C。13、C。14、C。15、C。16、D。17、C 基因定位的连锁分析是根据基因在染色体上呈直线排列，不同基因相互连锁成连锁群的原理，即应用被定位的基因与同一染色体上另一基因或遗传标记相连锁的特点进行定位。18、D。19、B。20、B ABC转运器最早在细菌质膜上的一种转运三磷酸腺苷酶，属于一个庞大而多样的蛋白家族。由于这个蛋白家族的每个成员都含有2个高度保守的ATP结合区，故命名为ABC转运器。通过结合ATP发生二聚化，ATP水解后解聚，通过构象的改变将与之结合的底物转移至膜的另一侧。21、B。22、C。23、A。24、C。25、C （17-15）×1000×10.4/3.54=5880。26、C。27、A。28、C。29、A。30、B（20-4）/4=4。
三、简答题
1、该肽含有Trp是芳香族氨基酸，在近紫外区有吸收峰λmax=280，会在280nm左右波长下有吸收峰。由于吸收辐射能而被提升到激发电子态的分子通过激发能的非辐射转移即荧光发射。因此荧光的波长要比激发光长。芳香族氨基酸如Trp，荧光发射光谱在348nm附近有发射峰，呈现较弱的荧光。
2、当胰岛素与其受即受体酪氨酸激酶体结合后，就激活胞内的酪氨酸蛋白激酶活性。激活一系列激酶，最终使蛋白磷酸酶1（PP1）活化。蛋白磷酸酶1（PP1）使糖原合酶和糖原磷酸化酶去磷酸化。即糖原合酶被激活而磷酸化酶失活。表现出的整体的生物学效应就是促进糖原合成，抑制分解。
糖尿病的发生直接原因是由于血液中胰岛素含量的不足。胰岛素缺乏，葡萄糖不能正常进入细胞滞留在血液中。而此时胰岛血糖素的浓度超过了胰岛素的浓度，一方面导致肝脏中过果糖-2，6-二磷酸的浓度下降，使糖酵解受到抑制又刺激了葡糖异生作用；另一方面又加速了糖原的降解，产生的过量葡萄糖也进入血液，这样就造成血液中的糖浓度很高，通过肾脏时，多余的糖无法被肾小管重吸收而排入尿中导致了糖尿病。
3、方法一：分光光度法。主要利用底物或产物在紫外或可见光部分的光吸收不同。选择一适当波长，测定反应过程中反映进行情况。细胞色素C再还原和氧化型的光吸收不同。当细胞色素氧化酶氧化细胞色素C时，测定光吸收的变化就可以测定酶的活力了；方法二：同位素测定法。用放射性同位素的底物，经酶作用所产生的产物，通过适当的分离，测定产物的脉冲数换算出酶的活力。用氧18标记的氧气作为底物，经酶作用后还原为含氧18的水。反应后将底物产物分离，测定脉冲数换算成酶活力。
4、如果是全保留复制机制，生长一代产生两种DNA分子各一个。一个分子双链是N15，另一个双链是N14生长二代，产生4个分子两种DNA，一分子全部含N15和3分子全部含N14没有杂和的。
5、DNA均由含ATCG四种碱基的脱氧核糖核苷酸组成，蛋白质均由20种氨基酸组成；在DNA序列与氨基酸组成对比上，三个dNTP对应一个氨基酸，且有些相同的氨基酸对应相同的三联密码子，可以推测 DNA指导蛋白质合成基本上使用同一套遗传密码，两者DNA有相同的上游控制序列，相同的起始密码子和终止密码子。在这个意义上说明生物是由进化而来的，而不是不同起源的。
四、问答题：
1、介质中球状蛋白质的折叠总是倾向与把疏水残基埋藏在分子的内部，这一现象称为疏水作用。它在稳定蛋白质的三维结构方面占有突出地位。疏水作用其实并不是疏水基团之间有什么吸引力的缘故，而是疏水基团或疏水侧链出自避开水的需要而被迫接近。蛋白质溶液系统的熵增加是疏水作用的主要动力。当疏水化合物或基团进入水中，它周围的水分子将排列成刚性的有序结构，即所谓的笼型结构。与此相反的过程使排列有序的水分子被破坏，这部分水分子被排入自由水中，这样水的混乱度增加，即熵增加，因此疏水作用是熵驱动的自发过程。 疏水作用在生理温度范围内随温度升高而加强，T的升高与熵增加具有相同得效果，但超过一定的温度后50~60度又趋减弱。因此超过这个温度疏水基团周围的水分子有序性降低，因而有利于疏水基团进入水中。
2、在生理条件下，大多数的酶不被底物所饱和，且底物浓度与Km相比要小得多 v=[Kcat/Km][E][S]
KcatA=100U/mg=100umol/mg•min=100umol•50kDa/0.001mol=5000/min Va/Vb=[KcatA/KcatB][KmA/KmB]=5
3、胆固醇的功能：⑴生物膜的组成成分，对调节膜流动性有很大作用⑵作为激素的前体，在体内转化为类固醇激素⑶形成胆汁盐促进脂类在小肠的消化吸收。
胆固醇合成中的五个中间物：乙酸、甲羟戊酸、异戊二烯衍生物、角鲨烯、羊毛固醇。
LDL，介导胆固醇的转运，将胆固醇从血液运送到靶组织细胞内；抑制靶组织的胆固醇及LDL受体的合成。
HDL，可以减少胆固醇的沉积，防止血栓形成。HDL可以回收从死亡，衰老细胞更新的细胞膜被降解血浆脂蛋白等释放到血浆中的胆固醇。其上的蛋白将其酯化为胆固醇只并将它转移到LDL。
4、先制备编码rRNA前体的DNA片段，可以将编码这个前体的DNA克隆到大肠杆菌质粒中，扩增后提取质粒。在体外构建一个RNA转录体系，转录出RNA前体。提取体系中RNA，在分有或无四膜虫蛋白质两组别，其中一组用加热，有机溶剂和蛋白酶来变性蛋白质，纯化前rRNA。待反应充分后，电泳分离，分别观察结果，如果发现在有无蛋白质的条件下，前体RNA都被分成几个不同的条带而且带型一样，可以证明前体RNA能自我剪接，而且不受四膜虫蛋白质影响。然后可以用电用来检测条带，是否发生了自剪切。条带可剪切回收，分析RNA序列，得到剪接位点。
5、最可能的原因是该转录因子是二聚体，且由相同的两个亚基构成。可以分离纯化蛋白质，用SDS-PAGE鉴定，如果凝胶上只有一条带且分子量为40kDa即可证明。
根据氨基酸的序列，相互作用281到344，每七个氨基酸有一个亮氨酸，且在该蛋白序列中富含脯氨酸和谷氨酸，这些特点说明该转录因子可能是亮氨酸拉链，依赖亮氨酸侧链间的疏水相互作用形成二聚体。
可以采用基因工程技术，定点突变每七次出现的亮氨酸残基，如果不能再形成二聚体便可以证明该推测。
中科院2007生化与分子
一、是非题：20题，共30分。答“是”写“+”，答“非”写“—”。
1、细胞凋亡时细胞色素c从线粒体膜上进入细胞浆后细胞发生的一系列变化与细胞色素c在溶液中有蛋白水解酶活性有关。
2、质谱法可用来测定多肽的分子量和氨基酸序列。
3、酶的失活意味着酶蛋白已经变性。
4、用异丙醇沉淀的总RNA可用于siRNA的分离纯化。
5、钙离子是细胞内重要信使，总体说来真核生物细胞内钙离子浓度大于细胞外。
6、内质网系膜的特异性标志酶是胆碱脱氢酶。
7、热休克蛋白是指在加热条件下容易发生变性的蛋白质。
8、酶的辅因子包括辅酶与辅基，两者的区别是前者与酶共价结合，而后者非共价结合。
9、tRNA前体中内含子的左端为GU，右端为AG。
10、线粒体膜有外膜与内膜；核膜也是由两层脂双层膜组成的。
11、蛋白质中的肽键（酰胺键）具有双键性质，因此不能自由旋转。
12、反式构型得脯氨酸较顺式构型稳定，因此蛋白质中的脯氨酸都是以反式构型存在。
13、酶分子中Cys残基的-SH既可以作为亲核基团起亲核催化作用，也可以作为广义酸碱起催化作用。
14、竞争性抑制剂是一类与底物竞争结合酶分子上同一部位的抑制剂。
15、AAUAAA是真核mRNA 3’加poly（A）的信号。
16、噬菌体ф29的pRNA是一种分子马达，它利用ATP水解的能量工作。
17、膜蛋白难以结晶得意重要原因是分子的二级结构有较多的β折叠。
18、α-酮戊二酸既是三羧酸循环的中间物，又是谷氨酸生物合成的前体。
19、从一个酶对其底物的Km值可以大致判断出这个酶的催化效率如何。
20、热休克RNAω是一种含小阅读框架的RNA。
二、选择题：30题，共45分。
1、由人线粒体DNA编码的多肽链有
A．7条 B．13条 C．27条 D．85条
2、下属物质中有抑制线粒体内膜ADP/ATP载体作用的是：
A．鱼藤酮B．苍术苷C．寡霉素D．抗霉素A
3、植物的光合磷酸化发生在：
A．叶绿体外膜B．叶绿体内膜C．类囊体膜D．以上三种膜4、要想配置pH5.0的缓冲液，可选用：
A．Tris-盐酸 B．磷酸钠 C．醋酸钠-醋酸 D．氯化钠-盐酸
5、红外光谱可用来测定蛋白质的二级结构，其检测的基本原理是：
A．电子跃迁 B．顺磁共振 C．化学键震动 D．微波发热
6、多巴胺是神经递质，其生物合成的前体是
A．肾上腺素 B．去甲肾上腺素 C．黑色素 D．酪氨酸
7、蛋白质分子中pKa值在5~9之间的解离基团包括
A．只有咪唑基 B．咪唑基与α羧基 C．咪唑基与α氨基 D．咪唑基、α氨基、α氨基
8、2006年若贝尔化学奖授予真核转录分析基础研究的开拓者，其主要贡献是
A．阐明了DNA酶促生物合成 B．阐明了真核RNA酶促生物合成
C．在电子显微镜照片上发现R-loop D．捕捉下DNA的复制过程
9、真核生物中尚未被发现的RNA是：
A．snoRNA B．imprinted RNA C．tmRNA D．stress RNA
10、去垢剂是用来增容膜蛋白的试剂，它们的共同特征是
A．都是有机溶剂 B．都具有阳离子基团和阴离子基团
C．都在溶液中呈碱性 D．都具有亲水基团和疏水基团
11、线粒体呼吸链复合物在传递氢/电子时有质子跨膜转运，产生的质子梯度被用来合成ATP。质子的来源
A．被脱氢氧化的底物 B．线粒体内的质子被泵出
C．线粒体内的质子与线粒体外的阳离子交换 D．线粒体的柠檬酸的解离
12、第一个得到原子分辨率解析的膜蛋白是
A．线粒体呼吸链复合物Ⅱ B．水通道蛋白 C．紫色细菌光合反应中心 D．K+通道蛋白
13、下属物质中有抑制钠钾-ATP酶作用的是
A．短杆菌肽 B．磷酸吡哆醛 C．乌本苷 D．两性霉素
14、调节胆固醇合成速度的主要是
A．鲨烯的浓度 B．低密度脂蛋白的浓度 C．HMG-CoA还原酶的活力 D．脂蛋白酯酶的活力
15、下列技术中不是用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的是
A．酵母单杂交 B．酵母双杂交 C．酵母三杂交 D．荧光共振能量转移
16、在下列作图法中，用来描述蛋白质空间结构的是
A．Ramachandran 作图 B．Hill 作图 C．Scatchard 作图 D．Bohr 作图
17、在多肽化学合成中，下列氨基酸中需要进行侧链保护的是
A．Phe B．Ile C．Trp D．Met
18、J．C．Kendrew和M。F。Perutz 由于研究下列哪两个蛋白质而获得1962年诺贝尔化学奖
A细胞色素C，细胞色素氧化酶B．肌红蛋白，血红蛋白C．胰岛素，核糖核酸酶D．肌动蛋白，肌球蛋白
19、用来储存蛋白质空间结构数据的数据库是
A．Swissprot B．Gene Bank C．Protein Data Bank D．Blast
20、蛋白质分子从极性环境移入非极性环境时的荧光发射光谱会有如下变化
A．波长（λmax）红移，强度（I）减小B．λmax 蓝移，I增大C．λmax 蓝移，I减小 D．λmax 红移，I增大
21、酶动力学双倒数作图法指的是
A．Michaelis-Menten 作图法 B．Briggs-Haldane 作图法
C．Cornish-Bowden 作图法 D．Lineweaver-Burk 作图法
22、DNA甲基化与组蛋白修饰对基因表达的调控被称为
A．遗传调控 B．非遗传调控 C．表观遗传调控 D．染色体调控
23、在大肠杆菌丙酮酸脱氢酶多酶复合体中，包含和利用的辅酶或辅基维生素是A．硫胺素焦硫酸和硫辛酸 B．硫胺素焦磷酸和四氢叶酸
C．硫辛酸与维生素B12 D．生物素与磷酸吡哆醛
24、一个酶的点突变导致其Km值增加，但Kcat/Km比值没有改变，这个突变体的活性相对于野生型酶来说是
A．不变 B．减小 C．增加 D．不能判断
25、脂肪酸分解代谢中最主要的氧化途径
A．α-氧化 B．β-氧化 C．γ-氧化 D．ω-氧化
26、根据现在的认识人类蛋白激酶种类有
A．200左右B．500左右C．800左右D1000多
27、用氯化铯-溴乙锭密度梯度平衡超离心分离DNA时超螺旋DNA位于
A．中央两条代的上带中B．中央两条代的下带中C．滴管的红色荧光带中 D．看不见的位置
28、一RNA制剂的A260/A280的比值为1.65，说明此制剂
A．质量好 B．有多糖污染 C．有DNA污染 D．有蛋白质污染
29、SiRNA不参与
A．基因沉默 B．引发异染色质化 C染色质的稳定 D引发常染色质化
30、真核生物mRNA帽式结构中m7G与1位核苷酸间的连接方式是
A．5’——2’ B．2’——5’ C．5’——5’ D．2’——2’
三、简答题：7题，共35分。
1、请描述线粒体DNA的结构特点。
2、抑制某个膜蛋白起物质转运的作用，如何判断这个膜蛋白的作用机制是作为膜上通道蛋白，还是膜上载体？
3、简述蛋白质中的膜体（Motif）、结构域（Domain）和家族（Family）。
4、简述三种定量测定蛋白质浓度的方法，并比较优缺点。
5、有ATP参与的催化反应的酶既有转移酶也有连接酶。请各举一例说明两种酶类应用ATP的不同特点。
6、试论逆转座子的生物学意义。
7、有一种miRNA在P19干细胞诱导分化成神经干细胞的过程中发生从无到有的变化请设计并说明研究该miRNA功能的一种实验方案。
四、问答题：4题，共40分。
1、试写出三类膜上信号转导受体及它们的结构与功能特点。
2、以镰刀型贫血症、糖尿病和疯牛病为例，谈谈分子病、代谢病和构象病。
3、蛋白酶解对一些蛋白质发挥功能其重要调节作用，如将没有活性的蛋白质前体（原）酶切后变为活化的蛋白质形式。除了这一点，请你再举出蛋白酶解对蛋白质（酶）功能调控的两种方式。
4、真核生物中，一个基因常常可以在不同的时间和空间内表达出不同的多种蛋白，请阐明三种有一个基因生产多种蛋白的机理及其生物学意义。
2007年攻读硕士研究生入学试卷《生物化学与分子生物学》答案
一、判断题
1、- 线粒体细胞色素c释放在细胞凋亡过程中起重要作用。细胞色素c释放到胞质后可引发caspase活化级联，导致细胞死亡。细胞色素c的释放是线粒体外膜通透性增高的结果。释放到细胞浆的细胞色素c在dATP存在的条件下与凋亡相关因子1（Apaf-1）结合，使其形成多聚体，并促使caspase-9与结合形成凋亡小体，caspase-9被激活，被激活的caspase-9能激活其他的caspase如caspase-3等，从而诱导细胞凋亡。2、+ 目前质谱主要测定蛋白质一级结构包括分子量、肽链氨基酸及多肽或二硫键数目和位置。3、-。4、-。5、- 钙离子泵对于细胞是非常重要的，因为钙离子通常与信号转到有关，钙离子浓度的变化会引起细胞内信号途径的反映，导致一系列的生理变化。通常细胞内钙离子浓度（10-7M）显著低于细胞外钙离子浓度（10-3M），主要是因为质膜和内质网膜上存在钙离子转运体系，细胞内钙离子泵有两类：其一是P型钙离子泵，其原理与钠钾泵相似，每分解一个ATP分子，泵出2个Ca2+；另一类叫钠钙交换器（Na+—Ca2+ exchanger），属于反向协同运输体系（antiporter），通过钠钙交换器来转运钙离子。6、- G-6-P。7、- 热休克蛋白（heat shock protein，HSP）是一类在生物进化中高度保守、广泛存在于原核、真核生物中的蛋白质，具有“分子伴侣”（molecular chaperone）作用，参与多种包内蛋白的折叠、装配和转运等功能。机体在受到高温或其它因素强烈刺激时，常可检测到具有保护作用的HSP。8、-。9、+。10、+。11、+。12、- 肽链中的顺势肽键往往就是脯氨酸参与的肽键，虽然反式构象占有绝对的优势，但顺式构想毕竟占有一定比例。13、+ 巯基酶类的-SH基各种酶都还有不同数量的Cys，他们有的作为结构残基，两个巯基之间形成-S-S-，用以维持酶分子特定构象，有的则作为酶活性中心的必须基团。Cys的-SH有三种作用：①亲核催化：如3-磷酸甘油醛脱氢酶活性中心的-SH对底物的醛基进行的亲核攻击作用②结合底物：巯基酶与底物结合有两种方式，较普遍的方式是酶的-SH与金属离子相连，在通过金属离子与底物结合；另一种方式是形成共价中间复合物③结合辅基：细胞色素c中，血红素就是以其乙烯基与酶蛋白中Cys14、Cys12的-SH形成巯醚键而结合的。14、+。15、-。16、+。17、- 由于膜蛋白的膜内区域具有广泛的疏水表面，从而能够适应生物膜上的非极性环境，也正是这一点是的膜蛋白从膜上解离下来后在极性的水溶液中难以稳定存在，会发生沉淀甚至变性，也就难以使其结晶。18、+。19、-。20、+。
二、选择题
1、B2、C寡霉素是氧化磷酸化的抑制剂，它与F1F0-ATPase的F0结合而抑制F1，使线粒体内膜外侧的质子不能返回膜内，ATP因此而不能合成。3、C4、B5、C6、D7、A8、B。9、C10、D。11、B。12、C。13、C。14、C羟甲基戊二酰辅酶A（HM-CoA）还原酶是胆固醇合成过程中的限速酶。15、A在酵母双杂交的基础上又发展了酵母单杂交、酵母三杂交和酵母的反向杂交技术。它们被分别用于核酸和文库蛋白之间的研究、三种不同蛋白质间的相互研究和两种蛋白相互作用的结构和位点。16、A。17、D。18、B。19、C。20、D。21、D。22、C。23、A。24、A。25、B。26、B。27、C。28、D。29、D。30、C。
三、简答题
1、（1）线粒体DNA称双链环状与细菌的DNA相似。（2）一个线粒体中可由一个或几个DNA分子，各种生物的线粒体DNA大小不一样。（3）线粒体DNA以半保留方式进行自我复制。（4）线粒体DNA能合成的蛋白质种类有限。
2、（1）载体蛋白既可介导被动运输，又可介导逆浓度梯度的主动运输；而通道蛋白质能介导顺浓度或电化学梯度的被动运输。 （2）设计实验时通过区分是否能逆梯度运输来判断载体蛋白还是通道蛋白。
3、模体：是蛋白质家族中最小的序列单位，使蛋白质区段排列对比中高度相似的区域。
结构域：多肽链在二级结构或二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体。
家族：结构的相似导致功能上的相似的一类蛋白质。
4、（1）紫外吸收法：利用蛋白某些集团具备紫外吸收的性质，虽然精确度不高，但是操作简便，样品可以回收同时可以估算蛋白含量。（2）双缩脲在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物，之一反应称为双缩脲反应。因为蛋白质中有多个肽键，也能与铜离子发生双缩脲反应，且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律，而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关，所以可用双缩脲法测定蛋白质的含量。常用于需要快递但并不需要十分精确的测定。（3）考马斯亮蓝与蛋白质结合后，其最大吸收波长从456nm改变为596nm，该蛋白燃料复合物吸光系数很高，所意见的灵敏度很高，能检测到1微克/毫升的蛋白，重复性好。
5、（1）转移酶：转甲基作用与蛋氨酸循环 蛋氨酸中含有S甲基，可参与多种转甲基的反映生成多种含甲基的生理活性物质。在腺苷转移酶催化下与ATP反应生成S-腺苷蛋氨酸。S-腺苷蛋氨酸中的甲基是高度活化的，称活性甲基。（2）连接酶：例如动物细胞的DNA连接酶，首先由ATP与酶反应，形成腺苷酰化的酶，其中AMP的磷酸基与酶的赖氨酸之ε-氨基以磷酰胺键相结合，然后酶将AMP转移给DNA切口处的5’-磷酸，以焦磷酸键的形式活化形成AMP-DNA。然后通过相邻键的3’-OH对活化的磷原子发生亲核攻击，生成3’，5’-磷酸二酯键，同时释放出AMP。
6、在基因组内存在着通过DNA转录为RNA后，再经逆转录为cDNA并插入到基因组的新位点上的因子，被称为逆转座子。按照其结构特点以及所编码反转录蛋白因子的不同，可分为反转录转位因子，反转录子，反转录病毒，能编码反转录所需蛋白的因子，不能编码反转录所需蛋白的因子。逆转座子在转位过程中须以RNA作为中间体，RNA较易变异，且RNA聚合酶和逆转录酶均无校对功能，这就使得逆转录子具有高度变异性。逆转座子可通过遗传变异、基因重排或对基因表达的影响，导致生物遗传多样性的形成。逆转座子除了能够促进基因的流动性增加遗传多样性外，它们散布在基因组中，还能够为进化的种子，当然对个体生物可能是致死或治病的。
7、设计序列实施对miRNA的RNA干扰，比较在miRNA不同干扰程度下的P19诱导分化成神经肝细胞的程度，从而对其作用进行研究。
四、问答题
1、（1）离子通道偶联的受体 分布既可分布在可兴奋细胞的细胞膜上，一般是四次跨膜蛋白，也可分布在内质网上或其他细胞器的膜上，一般是六次跨膜蛋白。这类受体对配体具有特异性选择，激活的通道对特异性离子也有选择性。（2）G蛋白偶联受体 G蛋白是三聚体GTP结合蛋白的简称，位于质膜内胞浆一侧，α，β，γ三个亚基组成，β，γ二聚体共价结合锚于膜上稳定α本身有GTP活性。G蛋白在信号转导过程中起分子开关作用，当G蛋白α亚基与GDP结合处于关闭状态，当胞外配体与受体结合形成复合物时，导致受体胞内结构域与G蛋白α亚基偶联，并促使α亚基结合的GDP被GTP交换而被活化，即处于开启状态，从而传递信号。（3）与酶偶联的受体 分为两类：其一是本身具有激酶活性，如肽类生长因子（EGF，PDGF，CSF等）受体；其二是本身没有酶活性，但可以连接非受体酪氨酸激酶，如细胞因子受体超家族。这类受体的共同点是：①通常为单次跨膜蛋白②接受配体后发生二聚化而激活，启动其下游信号转导。已知六类：①受体酪氨酸激酶②酪氨酸激酶连接的受体③受体酪氨酸磷脂酶④受体丝氨酸/苏氨酸激酶⑤受体鸟氨酸环化酶⑥组氨酸激酶连接的受体
2、镰刀型细胞贫血病：血红蛋白分子遗传缺陷造成的一种疾病，病人的大部分红细胞呈镰刀状。其特点是病人的血红蛋白β-亚基N端的第六个氨基酸残缺是缬氨酸，而不是正常的谷氨酸残基。血红蛋白是个四聚体蛋白，血红蛋白和肌红蛋白的氧和曲线不同，血红蛋白是个别构蛋白，因此镰刀型细胞贫血病是一种分子病。分子病由于遗传上的原因而造成的蛋白质分子结构或合成量的异常所引起的疾病。蛋白质分子是由基因编码的，即由脱氧核糖核酸分子上的碱基顺序决定的。如果DNA分子的碱基种类或顺序发生变化，那么由它们所编码的蛋白质分子的结构就发生相应的变化，严重的蛋白质分子异常可导致疾病的发生。
糖尿病无论Ⅰ型或Ⅱ型均由遗传因素决定，与感染、肥胖等环境因素相互作用，而导致胰岛素活性相对或绝对不足而发病。 代谢病：在体内生物化学过程发生障碍时，某些代谢物质如糖、脂肪、蛋白质、嘌呤、铜等堆积或缺乏而引起的疾病。病因可分为先天因素和后天因素。糖、蛋白质、脂肪及水、矿物质等代谢障碍，常常是相互影响和联系的，有时会造成恶性循环。各种代谢病均可影响全身各组织、器官。 疯牛病：Prion颗粒是基因编码的产生正常蛋白质的异构体，哺乳动物基因病码产生一种糖蛋白PrP在成长脑组织中PrP成为PrP6对蛋白酶敏感，在病变脑组织中的PrPsc疯牛病就是由于这两种异构体之间的转变使得代谢紊乱引起的。 构象病：疯牛病、老年性痴呆症、囊性纤维病变、家族性高胆固醇症、家族性淀粉样蛋白症、某些肿瘤、白内障等都是。就是相关蛋白质的三维空间结构异常。这种蛋白空间结构异常是由于治病蛋白质分子通过分子间作用感染正常蛋白质而造成的。
3、⑴有些蛋白激素也是以无活性的前体形式被合成。例如，胰岛素是由胰岛素原经蛋白酶出去一段C肽才被激活。⑵许多发育过程是酶原激活调控的。蝌蚪变态成蛙时，在几天的过程中从尾巴吸收大量的胶原，同时分娩后许多胶原在哺乳动物子宫中被破坏，在此过程中，前胶原酶转变成活性蛋白酶。
4、选择性拼连，时空表达，多肽水解
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